【摘 要】
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根结线虫(Meloidogyne spp.)病是番茄(Solanum lycopersicum)的重要病害之一,选育和推广抗病品种是防治该病最经济、有效、安全的方法,利用基因工程技术获得抗病基因是一
【机 构】
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广西农业科学院植物保护研究所,南宁530007
【出 处】
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中国植物病理学会2014年学术年会
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根结线虫(Meloidogyne spp.)病是番茄(Solanum lycopersicum)的重要病害之一,选育和推广抗病品种是防治该病最经济、有效、安全的方法,利用基因工程技术获得抗病基因是一条新的抗病育种途径.本试验采用同源克隆(resistance-gene analog,RGA)的方法,根据已克隆植物抗病基因的NBS (Nucleotide binding site)保守区域设计简并引物,对三份番茄抗根结线虫材料(TY52、T27、Bss368)基因组进行体外扩增,获得约500bp的预期片段；PCR产物目的片段克隆获得35条PCR扩增序列,其中3条序列具有完整开放阅读框(ORF)和NBS-LRR结构域.聚类分析结果显示,3条番茄RGAs(resistance-gene analogs)与马铃薯抗胞囊线虫基因Gpa2、番茄抗胞囊线虫基因Hero、番茄抗丁香假单孢菌基因Prf、番茄抗根结线虫基因Mi聚为一类,这三个基因为CC-NBS-LRR基因；这3条RGAs之间的相似性为35％ ～37％；同源性分析表明,3条RGAs与已知抗病基因的NBS区域的氨基酸序列间的相似性差异较大,与Gpa2相应区域氨基酸相似性为36％ ～ 53％、与Hero相应区域氨基酸相似性为32％ ～47％、与Pry相应区域氨基酸相似性为34％ ～51％、与Mi相应区域氨基酸相似性为34％ ～51％.研究发现的RGAs可用于分子标记辅助育种和为功能性抗病相关基因的克隆奠定基础.
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