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目的通过观察肾衰养真胶囊对胰岛素所刺激的脂肪细胞 Leptin 分泌及 Leptin 基因启动子 CCAAT 框增强子结合蛋白(C/EBPα)mRNA 表达的影响,以进一步探讨肾衰养真胶囊治疗 CRF 营养不良的可能作用机制。方法取正常雄性 SD 大鼠附睾脂肪垫组织,原代培养,诱导分化成为成熟的脂肪细胞。实验前先用无血清培养基培养24h 使细胞同步化,然后分为4组:(1)正常细胞组:DMEM 培养液+10%胎牛血清;(2)胰岛素刺激组:DMEM 培养液+700nmol/L 胰岛素:(3)空白血清组:DMEM 培养液+700nmol/L 胰岛素+10%空白大鼠血清:(4)中药血清组:DMEM 培养液+700nmol/L 胰岛素+10%肾衰养真胶囊含药血清。以上各组继续培养48h 后,吸取上清0.5ml 用于 Leptin 水平检测,RT—PCR 检测细胞 C/EBPαmRNA 的表达。结果经胰岛素处理48h 后,胰岛素刺激组细胞 Leptin 分泌量较正常细胞组显著增高(P<0.05),中药血清组细胞 Leptin 分泌量较胰岛素刺激组显著降低(P<0.05)。中药血清组 C/EBPαmRNA 表达量显著低于胰岛素刺激组(P<0.01)。结论本研究在体外进一步证实,用含肾衰养真胶囊血清干预的脂肪细胞 Leptin 水平、C/EBPαmRNA 表达量明显低于胰岛素刺激组。提示,用含中药肾衰养真胶囊的血清干预时,C/EBPα表达量的减少可能使 OB 基因的表达受到部分抑制,从而降低血 Leptin 浓度。既往 CRF 患者营养不良、厌食一直被认为与尿毒症毒素蓄积有关,但近年来研究表明,无论是否进行透析治疗,CRF 患者普遍合并高 Leptin 血症。Leptin 是由 OB 基因编码,主要由脂肪组织分泌的一种多肽类激素,生物学作用主要是感受机体的营养状况,进而抑制食物摄入;刺激或维持能量消耗;促进代谢过程。CRF 时,肾脏清除 Leptin 的能力下降,升高的 Leptin 可通过影响下丘脑的神经内分泌功能,抑制神经肽 Y 而引起患者食欲下降,蛋白质、能量摄入减少。同时,高 Leptin 水平可增加交感神经系统的活性,使机体能量消耗增加,从而重新调整脂肪含量和增加肌肉消耗,进而导致营养不良。C/EBPα是脂肪细胞分化中的重要转录因子,当 C/EBPα与 OB 基因含 C/EBPα的结合位点的 DNA 序列结合后可使 Leptin 的转录活性增加23倍,从而促进 Leptin 的表达。本实验初步证明肾衰养真胶囊改善营养不良的可能机制之一是通过抑制 C/EBPα的表达从而削弱脂肪细胞 Leptin 的过度表达。