线型及人工环化的天蓝色链霉菌质粒SCP1上的三个复制区的研究

来源 :2012年第五届全国微生物遗传学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yindiend
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  本文在前人的研究中,证明了SCP1上有一段5.4kb大小的DNA在变铅青链霉菌中具有独立复制的功能.发现SCP1上其实存在三个复制区,随后研究确定了各个复制区内ORF的转录起始位点,而且发现三个复制区均可以独立地以线型或者环型的形式在变铅青链霉菌中发挥复制功能.除了rep2A外,其他两个复制区可以被分别和连续地敲除;并且被敲除的质粒还保持着遗传稳定性和高效的接合转移能力,在拷贝数上也没有很大变化.同时,还人工构建了长达280kb的环型SCP1菌株C-SCP1,虽然在拷贝数上稍有下降,但环化SCP1的稳定性和接合转移能力和天然线型SCPl相比几乎没有变化.最后在液体培养基中取不同生长时间点的A3(2)和C-SCPl菌丝体,抽提RNA以后进行RT-PCR实验,发现三个复制区在不同形态的SCP1中表达水平和趋势存在差异,暗示了在生长过程中,质粒上不同复制区之间存在复杂的相互作用.
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