【摘 要】
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利用PCR从重组质粒PBV220-IFN-α中扩增鸭α干扰素(IFN-α)成熟蛋白基因并克隆到PMD18-T载体,测序鉴定后将其连接到原核表达载体pET32a+,转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导后获得高效表达。表达的重组蛋白分子量大小约37KD,以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的30％。利用镍金属螯合介质填料对表达产物进行纯化,经过复性后加入长成单层的鸭胚成纤维细胞(DEF)作用18h,
【机 构】
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四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心,四川雅安 625014 动物疫病与人类健康四川省重点实验
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛
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利用PCR从重组质粒PBV220-IFN-α中扩增鸭α干扰素(IFN-α)成熟蛋白基因并克隆到PMD18-T载体,测序鉴定后将其连接到原核表达载体pET32a+,转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导后获得高效表达。表达的重组蛋白分子量大小约37KD,以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的30％。利用镍金属螯合介质填料对表达产物进行纯化,经过复性后加入长成单层的鸭胚成纤维细胞(DEF)作用18h,接种100PFU鸭瘟病毒(DPV)强毒后,利用实时定量PCR检测1h、4h、9h、15h、23h、31h、39h、47h、55h、63h DPV的数量变化。结果:在DPV感染后15 h内,重组鸭IFN-α抗DPV组的病毒核酸拷贝数与不加鸭IFN-α的阳性对照组之间差异不显著；从23h开始鸭IFN-α保护组的核酸拷贝数低于阳性对照组并在感染后47h-55h其拷贝数差异达到最大,差异显著；与阳性对照组的DPV拷贝数相比,鸭IFN-α保护组在55h时能减少病毒108.83个核酸拷贝数,相对抑制率为80％.表明重组鸭IFN-α能明显抑制对数期的DPV复制,具有进一步临床应用的潜力。
其他文献
本试验旨在探讨日粮中添加微生态制剂(普乐宝Ⅱ)对经强制换羽后的种鸡生产性能的影响.选600只经人工强制换羽后的371日龄岭南黄种鸡,随机分为3组:B、B、B.B为对照组饲喂基础日粮,B、B分别在基础日粮上按300mg/kg及600mg/kg比例添加普乐宝Ⅱ,试验期90天.结果显示:微生态制剂(普乐宝Ⅱ)能提高种鸡产蛋率,提高种蛋孵化率,降低料蛋比,使强制换羽后的种鸡提早恢复生产性能.
对兔舍环境中气载内毒素含量以及革兰氏阴性菌含量与内毒素含量之间的数量关系、革兰氏阴性菌群的构成、气载需氧菌含量进行了研究,与此同时,还对兔舍内环境中气载内毒素的来源进行了分析.在测量的兔舍中气载内毒素的含量介于45~460EU m空气之间;需氧革兰氏阴性活菌的含量介于0.3~1.9×10CFU m空气之间;革兰氏阴性菌菌群占优势的是肠杆菌,其中大肠杆菌最为常见,还分离到假单胞菌、奈瑟氏菌、巴氏杆菌
本文目的是研究微生态活菌制剂饲料喂养雏鸡的生长抗病情况.方法:将60只1日龄雏鸡随机分成2组分别作雏鸡饲养试验和攻毒试验,实验组从1日龄开始每天每只雏鸡口服活菌制剂,对照组不服用,3天后两组鸡同时口服鸡白痢沙门氏菌.结果:30日龄时实验组比对照组平均日增重高4.12﹪(p<0.05),用鸡白痢沙门氏菌攻毒后,实验组雏鸡第5d开始拉白痢,而对照组第3d出现拉白痢.实践证明微生态制剂对促进动物生长及防
选用1日龄AA肉仔鸡,在基础日粮中添加0.1％和0.2％的宝肠安,以基础日粮为对照,进行为期7周的饲喂试验,分阶段统计增重、耗料,并对粪便中的微生物计数.结果:试验组肉仔鸡的末期平均体重、净增重和日增重均高于对照组,差异显著,但均比抗生素组低,差异不显著.试验组肉仔鸡的平均耗料量均略高于对照组,试验组的饲料利用率较对照组提高3.14％,比抗生素组低.试验组肉仔鸡粪便中双歧杆菌的数量远高于对照组,但
利用粗木聚糖半纤维素为唯一碳源,从牛羊瘤胃内容物、玉米地秸秆周围的土壤等样品中分离得到2株产木聚糖酶省活力较高的芽孢杆菌菌株L2-19和Y25.经形态、生理生化鉴定,初步确定两株菌分别为短小芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌.同时,研究了碳源、氮源等因素对该菌产木聚糖酶的影响及2株菌的安全性。结果表明,L2-19菌株以麸皮为最佳碳源,酵母膏为最佳氮源;Y25菌株以麸皮为最佳碳源,(NH4)2SO4为最佳氮源.
[目的]:对陕西宝鸡地区的20头健康奶牛和20头患子宫内膜炎奶牛生殖道内微生物区系进行研究.[方法]:采用常规的细菌分离鉴定方.[结果]:健康奶牛乳酸杆菌、产乳酸球菌和表皮葡萄球菌的分离率明显高于患病奶牛的分离率,差异显著(P〈0.05):大肠埃希菌,金黄色葡萄球菌、链球菌的分离率分别低于患病奶牛,差异显著(P〈0.05).[结论]:产乳酸细菌、表皮葡萄球菌是健康奶牛生殖道微生物区系的优势菌群,奶
本文采用严格的厌氧技术,从山羊瘤胃中分离到16株厌氧真菌,通过纤维素钠平板培养,刚果红平板染色观察,7株厌氧真菌具有明显水解圈.通过光学显微镜对具有水解圈与菌落直径比(H/C)最高的WA1菌株进行孢子形态、孢子运动、孢子囊形态、菌落和菌丝形态等的特征观察,初步鉴定为Orinlmyces菌属(O型厌氧真菌).
猪大肠杆菌病是由埃希氏大肠杆菌感染引起的一类猪的传染病。目前已有173个O抗原,99个K抗原,56个H抗原,引起各种动物败血癌、幼畜腹泻、家禽卵巢炎、腹膜炎等。本实验分别收集广东某大型猪场2003-2006年四年内该猪场大肠杆菌病发病猪样本13个,进行分离和分析鉴定。以了解流行于该场的大肠杆菌的主要类型及其变化,同时了解其耐药性的变化,为研制流行于该地区养猪场大肠杆菌疾病的特异疫苗与用药提供参考依
疱疹病毒为一类具有相同形态学且有较大囊膜的双链DNA病毒,其基因组由特定长区(UL)和特定短区(US)两个共价结合的片段组成,两端为末端重复序列(TR),UL和US连接处有内部重复序列(IR)。UL32是位于疱疹病毒特定长区的基因,在不同疱疹病毒亚科编码不同类型的蛋白,其作用是促进病毒DNA的壳体化,与病毒粒子在细胞质内的成熟有关。本文就疱疹病毒UL32基因及其编码蛋白的特点、亚细胞定位、功能以及
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