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属于正链RNA病毒的肠道病毒71型(EV71)是导致手足口病的主要病原体，该病毒所编码的依赖RNA的RNA聚合酶(RdRP)现已成为抗病毒药物开发的主要靶点，因此RdRP相关结构的解析将有利于开发针对手足口病的药物.在本研究中，前段带有泛素的EV71原型株RdRP被构建到pET-26b载体上，进而转化到含有pCG1质粒(该质粒用于表达切割泛素的酶)的大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中.通过IPTG诱导表达，并通过亲和、阴离子交换及凝胶过滤三种层析方法，得到了具有均一氨基末端的高纯度RdRP.得到的蛋白经过一种96条件试剂盒初步筛选，通过坐滴法分别在4种条件下得到不同形状和大小的晶体.通过X-射线衍射方法鉴定，其中沉淀剂为磷酸盐的条件下生长的晶体尺寸虽小，但有序度较高，分辨率可达到3.0埃左右，因此决定对该条件进行优化，以期得到更高质量的晶体.通过以下几种策略对该条件进行优化：1、改变结晶的方式，将坐滴改为悬滴；2、改变液滴的大小；3、改变蛋白与条件溶液之间的比例；4、改变蛋白的浓度.通过以上的优化，得到了一些质量有所提高的晶体.综上所述，本研究希望实现对EV71原型株RdRP的晶体结构解析，为进一步了解RdRP的功能及相关的药物开发提供结构信息.