白肉枇杷新品种实生后代群体遗传多样性及父本分析

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‘华白1号’是从白砂枇杷品种‘软条白沙’实生后代中筛选出的优良变异单株,于2014年通过重庆市农作物新品种鉴定,其果肉细嫩化渣、汁多味甜,具有早结丰产、大果优质等诸多优点,其综合品质更优于‘软条白沙’。2012—2013年,‘华白1号’实生子代部分单株开始试花结果,其中一些单株的叶片性状和果皮颜色存在明显差异。为了初步明确形成这些差异的原因,对‘华白1号’枇杷新品种实生子代群体进行果实生物学性状分析,并利用SSR分子标记技术对子代单株,‘华白1号’母本和候选父本进行遗传多样性分析,评价供试枇杷种质资源的遗传多样性水平及亲缘关系。‘华白1号’实生子代结果单株种植在西南大学果树学重点实验室歇马枇杷种质资源圃。‘华白1号’母树及18个候选父本单株取自长寿枇杷种质资源圃。生物学性状调查参照《农作物种质资源鉴定技术规程》,对实生子代中挂果单株及父母本单株的果实性状进行测量并赋值,使用SPSS13.0数据分析系统进行主成分分析。提取实生后代和候选亲本的基因组DNA,进行SSR分子标记分析,利用POPGENE软件计算各位点的等位基因数、有效等位基因数、指数、期望杂合度和观察杂合度等数据。利用CERVUS 3.0.3软件对18个候选父本及190份子实生代进行父本分析。对形态学调查结果的主成分分析表明,9个果实生物学性状可划分为3个主成分,平均单果质量、最大单果质量和横径为第一主成分;果皮颜色色、果肉颜色、果形指数和纵径为第二主成分,果实心室和可溶性固形物为第三主成分,3个主成分的累计贡献率为82.96%。利用筛选出的23对多态性SSR引物在实生子代单株中共扩增出63个等位基因,每对引物平均扩增出2.74个等位基因,平均有效等位基因数为1.80,平均观察杂合度为0.24,平均期望杂合度为0.39,平均固定指数为0.54,平均多态信息量为0.35。其中引物Hi04e04能鉴定出候选父本‘大五星’三倍体A35的倍性,扩增出235、227和211 bp等3个等位基因。对190份实生单株及其候选父本进行分析,可信度在95%时,可以确定8个子代单株的父本;而可信度为80%时,能模拟检测出20份子代单株的父本。可确定候选父本中共有7个单株与母本单株杂交产生了种子,其中E2428父本单株与母本单株杂交产生的子代最多,达到10个,其余检测出的父本单株只产生了1~3个子代单株。余下的170份子代单株为母本单株自交得到的实生单株,母本单株自交率为89.47%。
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