【摘 要】
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LAMP检测技术是近年来新兴的检测技术,具有特异、灵敏、快速的特点。为了对禽流感建立快速实用分子生物学检测技术,我们借助新兴的环介导等温扩增技术,建立了禽流感病毒通用
【机 构】
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深圳出入境检验检疫局; 华南农业大学动物科学学院; 中山大学生命科学学院;
【基金项目】
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“十一五”食品安全关键技术研究(2006BAK02A29)。
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LAMP检测技术是近年来新兴的检测技术,具有特异、灵敏、快速的特点。为了对禽流感建立快速实用分子生物学检测技术,我们借助新兴的环介导等温扩增技术,建立了禽流感病毒通用型灵敏、特异、快速的分子生物学检测方法体外等温扩增检测方法。通过对Genbank已报道的多个亚型的禽流感病毒的HA基因进行序列分析比较,设计了6条针对禽流感M基因的8个位点的特异性LAMP简并引物,建立了从核酸抽提到RT-LAMP检测共需要115min的快速检测技术。该方法灵敏,检测灵敏性与实时荧光RT-PCR相当;特异,对其他引发家禽呼吸道病的病毒检测均为阴性;简单,不需要复杂的仪器,只要常规水浴锅在65℃即可进行,通过加入染料后目测可以实现对扩增结果的判断。该方法是适合基层和现场检测的快速灵敏实用的分子生物学检测方法。
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