【摘 要】
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自英国引进3株荧光素标记的针对狂犬病毒核蛋白的单克隆抗体，建立狂犬病直接免疫荧光诊断技术。根据已知狂犬病毒核蛋白(N或NP)基因序列，设计合成4对引物，建立狂犬病RT-PCR及套式PCR诊断技术。自牟定采集发病犬脑组织样品15份，免疫荧光及PCR诊断结果均为阳性。对PCR产物进行纯化后，克隆至pMD18-T。载体测序(基因库登录号：EU095330)，并与已知代表毒株对应序列进行比对及系统发育分析
【机 构】
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西北农林科技大学动物科技学院 陕西 杨凌 712100 云南省动物疾病预防控制中心 昆明 6500
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自英国引进3株荧光素标记的针对狂犬病毒核蛋白的单克隆抗体，建立狂犬病直接免疫荧光诊断技术。根据已知狂犬病毒核蛋白(N或NP)基因序列，设计合成4对引物，建立狂犬病RT-PCR及套式PCR诊断技术。自牟定采集发病犬脑组织样品15份，免疫荧光及PCR诊断结果均为阳性。对PCR产物进行纯化后，克隆至pMD18-T。载体测序(基因库登录号：EU095330)，并与已知代表毒株对应序列进行比对及系统发育分析，结果表明：云南牟定狂犬病毒属于基因1型和血清1型毒株，与2006年广西发病犬分离毒株遗传关系密切，病毒部分N基因核苷酸及推导的氨基酸序列同源性分别为97.4％和99.0％。
其他文献
子宫蓄脓是指子宫腔内积有脓液。本该病一年四季均可发病，无明显的季节性。化脓性子宫内膜炎及急、慢性子宫内膜炎，化脓性乳房炎可引起本病，其他部位化脓灶转移亦为诱因之一。本试验利用B超的实时显像技术，通过腹腔穿刺子宫，采集临床确诊为犬子宫蓄脓的子宫内容物50份，进行细菌的分离培养及生化鉴定，以确定子宫内容物中细菌的种类。同时对分离出的细菌进行药物敏感性试验，筛选出细菌敏感性药物，为犬子宫蓄脓的临床治疗参
自海湾战争以来，美军连续进行了阿富汗战争、科索沃战争和伊拉克战争，并都取得了巨大的军事胜利。在这几场战争中，军犬发挥了重要的作用。本文介绍了军犬的主要品种及要求，并结合对各国军犬的训练及管理，就反恐维稳中军犬的应用进行探讨。
毒品犯罪是全球性的社会公害，在当今世界上，几乎没有哪一个国家能够全面地遏制它的蔓延。许多国家的吸毒问题日益成为严重的社会问题，由于吸毒问题诱发的各种犯罪也与日俱增，尽管许多国家采取了各种各样的措施大力禁毒，但毒品仍像瘟疫一样在许多国家蔓延，成为国际社会上的一大公害。警犬缉毒作为一项查缉毒品的有效手段，在当前严峻的禁毒斗争形势下，发挥了不可替代的作用。虽然，当前国内外许多缉查部门都在积极地训练和使用
从我国南京地区流行的犬细小病毒病病犬的肠溶物中分离出一株细小病毒(CPV)。以煮沸的病毒细胞培养物模板，特异引物进行PCR扩增，PCR产物连接pMD18-T载体并转化E.coliJM109。重组质粒pTCPV-VP2经PCR鉴定、限制酶切分析和序列分析，结果表明：NJ-04的基因型是CPV-2a，与参考毒株的核酸同源性超过98.5％，氨基酸同源性超过97.8％。没有形成明显的CPV中国分支。
目的: 分析五大品种犬vWF基因中五个候选区域的多态性，了解vWD基因频率，为遗传育种、培育出更加优良的警用工作犬奠定基础。方法: 采用PCR—SSCP技术，对vWF基因中五个候选区域进行基因多态性检测。结果:PCR-SSCP分析结果表明，五个候选区域中vWF基因第43内含子5’侧翼区序列具有多态性，并且只在杜伯文犬中发现。表现为A、G两个等位基因和AA、GG、AG三种基因型，vWD基因频率为1
从昆明某动物园、军犬基地病死的小熊猫、浣熊、犬的肠内粪便和国产疫苗中，经F81细胞分离得到四株细小病毒。根据GeneBank中已发表的cPV序列设计合成了VP2基因的一对特异性引物，扩增出约1750bp的片段。经商业测序后，利用DNAstar软件对该片段进行序列分析。结果表明：所扩增基因片段长度为1755bp，与Genebank中已发表参考株的VP2基因序列相比较，核苷酸同源性97.9％～99.9
根据GenBank中已发表的CAV纤突基因序列，设计合成4对8条引物，用已建立的PCR方法，对犬2型腺病毒沈阳分离株第5代强毒经蚀斑克隆驯化的第60代毒弱毒(SY—V60)、和犬1型腺病毒长春犬株(CCC-V6)的纤突基因进行了扩增，PCR产物经纯化后进行基因序列测定，测序结果经拼接后得到了一个由1632个和1629个核苷酸组成的纤突蛋白全基因序列，分别编码543和542个氨基酸。犬2型腺病毒(S
根据GenBank中已发表的CAV纤突基因序列，设计合成2对4条引物，用已建立的PCR方法，对犬2型腺病毒沈阳分离株第5代强毒(SY-V5)、经蚀斑克隆驯化的第60代毒弱毒(SY—V60)、SY—V60在易感犬体上传5代的回收毒(SY—CP5)、美国疫苗毒(US—V20)4个毒株的纤突基因进行了扩增，PCR产物经纯化后进行基因序列测定，测序结果经拼接后得到了一个由1632个核苷酸组成的纤突蛋白全基
根据已发表的CAV纤突基因序列，用PCR方法，对CAV-2的4个毒株和CAV-1的4个毒株的纤突基因进行了扩增和测序，测定的核苷酸序列经推导得到分别编码543和542个氨基酸的CAV纤突蛋白全序列。测定的CAV-2比较表明：我国流行的CAV-2 SY株强毒与国外标准强毒株Toronto A26/61株相同，其驯化致弱的毒株与驯化前相比在1134位发生碱基颠换。测定的CAV-1比较表明：我国流行的C
选用5头已通过警犬鉴别考试的德国牧羊犬，根据“配对-非配对”方法鉴别人体气味。试验结果表明：温度在5-25℃范围内，警犬鉴别人体气味的成功率平均为83.2％，对不同温度范围内警犬鉴别人体气味的成功率进行方差分析，差异不显著；对于延时不同时间的气味进行分析，发现延时6h之内的气味鉴别成功率高达82％，其鉴别结果的可信度高于国家法庭规定的可信度不低于4.3的要求。