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背景:N-乙酰半胱氨酸(NAC)作为巯基供给体,是一种抗氧化剂。NAC作为抗氧化剂可以抑制恶性肿瘤的发展,而降低Notch3信号通路的活性亦可以抑制恶性肿瘤的发展。目的:本研究旨在探讨NAC对Notch3受体蛋白表达的影响,NAC对Notch3信号通路的下游基因的表达的影响,以及NAC对Notch3信号通路的调控作用对肿瘤细胞表型的影响。方法:本研究采用不同浓度的NAC处理HeLa细胞并在不同时间点收集样本,采用免疫印迹、荧光定量PCR、报告基因的方法检测NAC对Notch1和Notch3受体蛋白表达的影响以及Notch信号通路的下游基因Hes1和HRT1表达的影响。为探讨NAC对Notch3信号通路的调节机制,采用γ-secretase的抑制剂DAPT和Catalase处理细胞,或将N3IC质粒转染入细胞,然后用免疫印迹检测Notch3或其胞内活性区域蛋白的表达水平。另外,为研究NAC对Notch3信号通路的作用对其他女性肿瘤细胞表型的影响,本研究分别采用台盼蓝染色法检测5种细胞的增殖、Wound Healing和Transwell的方法检测MCF-7和Hela细胞的增殖、迁移和浸润的影响。结果:NAC在时间和浓度效应方面都显著抑制了Notch3受体蛋白的表达,但是对Notch1受体蛋白的表达没有明显的影响。Notch3信号通路的下游基因Hes1和HRT1,在NAC的作用下,其表达水平也显著降低。HeLa及MCF-7细胞的浸润、迁移以及五种肿瘤细胞的增殖在NAC的作用下均有显著性减弱。结论:本研究首次发现NAC可抑制Notch3受体蛋白的表达,而且NAC并不是作为抗氧化剂,来对Notch3信号通路活性起抑制作用的。并且证明了NAC的作用位点是在Notch3受体的跨膜区域。