【摘 要】
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目的：探讨利用慢病毒介导小干扰核糖核酸(siRNA)沉默人体端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)的可行性及其对宫颈癌caski细胞增殖和凋亡的影响.方法：用前期构建的慢病毒表达载体anti-hTERT-LV和NC-LV,转染宫颈癌caski细胞.实验分为NC组(空白对照组)、NC-LV组(阴性对照组)及anti-hTERT-LV
【机 构】
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广西南宁 广西医科大学附属肿瘤医院 妇瘤科 530021
【出 处】
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广西医学会妇产科学分会2015年学术年会
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目的：探讨利用慢病毒介导小干扰核糖核酸(siRNA)沉默人体端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)的可行性及其对宫颈癌caski细胞增殖和凋亡的影响.
方法：用前期构建的慢病毒表达载体anti-hTERT-LV和NC-LV,转染宫颈癌caski细胞.实验分为NC组(空白对照组)、NC-LV组(阴性对照组)及anti-hTERT-LV组(干扰组)共3组.采用实时荧光定量PCR反应(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测hTERT基因表达量(以与GAPDH相对比值表示),采用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况.3组hTERT mRNA表达、细胞周期、细胞凋亡率、细胞克隆数比较采用方差分析.
结果：anti-hTERT-LV组hTERT基因相对表达量明显低于NC组及NC-LV组,差异有统计学意义(P均＜0.05).anti-hTERT-LV组G1期细胞比率明显高于NC组和NC-LV组,差异有统计学意义(P均＜0.05);anti-hTERT-LV组S期细胞比率明显低于NC组和NC-LV组,差异有统计学意义(P均＜0.05).anti-hTERT-LV细胞凋亡率明显高于NC-LV组和NC组,差异有统计学意义(P均＜0.05).
结论：慢病毒介导siRNA可以沉默hTERT基因可以特异高效地抑制宫颈癌caski细胞hTERT基因的表达,增加细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的生长和增殖的形成.
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