目的：探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)的蚀斑形成实验最适工作条件，建立稳定易行的HCMV蚀斑技术，用于HCMV的定量测定及体外抗病毒物质活性测定的研究。 方法：HCMV病毒悬液接种至人胚成纤维细胞(HF)单层，37℃吸附1h，分别用含0.463‰、0.925％oNaHCO3及0.5％、1％DMSO琼脂糖覆盖，1周后加盖第2层;2周后用0.5％结晶紫染色5min，计数、计算pfu·ml-1，挑取蚀斑培养后采用PCR对HCNIV UL83基因鉴定;分别用HCMV、水痘-带状疱疹病毒(VZV)、单纯疱疹病毒(HSV)患者血清及HCMV AD169株兔免疫血清进行蚀斑抑制实验，并计算中和抗体滴度;对不同浓度更昔洛韦(ganciclovir，GCV)采用蚀斑减少实验测定该药物的抗HCMV活性。 结果：HCMV对照孔在5天出斑，蚀斑为圆形、实心、不透明状;两种浓度NaHCO3对蚀斑形成数量、大小有明显影响且病毒滴度亦有显著性差异(P＜0.05)。在含0.463‰NaHCO3培养孔内，出斑时间提前至3天;但不同浓度的DMSO对蚀斑数量、大小以及病毒滴度的影响无显著性差异(P＜0.05)。HCMV患者血清及HCMVAD169株兔免疫血清均可以抑制蚀斑形成。利用蚀斑减少实验测定GCV抗HCMV活性，可在7内天获得结果。 结论：HCMV蚀斑形成实验条件经优化后，可以方便稳定地对HCMV进行定量测定以及抗病毒活性物质的筛选和评价。