【摘 要】
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目的:研究腺病毒介导的IL-24和OSM双基因共表达对CNE-2Z细胞的抑癌放疗增敏作用及分子机制.方法:实验分为:PBS组、Ad-GFP(空病毒)组、Ad-IL24-OSM、放疗及Ad-IL24-OSM加放疗
【机 构】
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苏州大学医学部 细胞与分子生物学教研室 江苏 苏州 215123
【出 处】
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第18次全国干扰素及细胞因子学术会议
论文部分内容阅读
目的:研究腺病毒介导的IL-24和OSM双基因共表达对CNE-2Z细胞的抑癌放疗增敏作用及分子机制.方法:实验分为:PBS组、Ad-GFP(空病毒)组、Ad-IL24-OSM、放疗及Ad-IL24-OSM加放疗组(联合组).以50MOI各重组腺病毒分别感染CNE-2Z细胞,RT-PCR法检测IL-24和OSM目的基因在CNE-2Z细胞中的表达,Western blot法鉴定IL-24和OSM基因在CNE-2Z细胞中的蛋白表达;MTT法检测各重组腺病毒对CNE-2Z细胞的生长抑制作用;经Annexin-V-PE/7-AAD染色后流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率变化;RT-PCR检测CNE-2Z细胞中P21、P27、Bcl-2、Survivin等因子的表达.采用CNE-2Z细胞株建立人鼻咽癌裸鼠模型,然后按上述各组进行瘤体内局部注射用药和/或放疗干预,动态测量肿瘤体积,并计算瘤重抑瘤率和Q值;免疫组化检测P53、P21、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cox-2基因的表达.结果:OSM和IL24基因在CNE-2Z细胞中能够有效表达;Ad-IL24-OSM+放疗组对CNE-2Z细胞的生长抑制作用优于放疗组、Ad-IL24-OSM组(P＜0.01),呈现抑癌增效相加作用(Q=1.01);Ad-IL24-OSM+放疗组对CNE-2Z细胞的细胞凋亡率明显高于放疗组、Ad-IL24-OSM组(P＜0.01);Ad-IL24-OSM+放疗组可明显上调P21、P27的表达,下调Bcl-2、Survivin等因子的表达.体内联合组能显著抑制肿瘤生长,瘤重抑瘤率达78.34％,具放疗增敏协同效应(Q=1.01).免疫组化结果示联合组能明显上调P53、P21、Bax、Caspase-3的基因表达,和下调Bcl-2、Cox-2基因的表达.结论:Ad-IL24-OSM+放疗对CNE-2Z细胞均具有抑癌增效作用,其分子机制可能与上调P21、P27、P53等促凋亡因子的表达,下调Bcl-2、Survivin、Cox-2等凋亡抑制因子的表达有关.
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