烧伤对外周血循环纤维细胞表达细胞因子活性的影响

来源 :2014中华医学会整形外科分会第十三次全国学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:michael8363
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  目的 探索烧伤对外周血循环纤维细胞(cFb)功能活性的影响。方法?采用密度梯度离心法分离烧伤患者外周血单个核细胞(PBMCs),接种于含20%FBS的高糖DMEM培养液中,连续培养28天。每次更换细胞培养液时,除了给予PBS漂洗之外,不作任何处理。细胞分离、接种后当天、第3、5-6、7-8、14、17、21、24、28天于倒置显微镜下观察细胞增殖及形态变化,并用数码相机采集图片。用免疫细胞荧光染色和免疫细胞化学染色方法对分离培养14天的贴壁细胞进行表型鉴定。实时定量PCR法检测分离培养14、28天的贴壁细胞表达ECM蛋白Col-Ⅰα、趋化因子MIP-1α、趋化因子受体CCR5、炎症介质TNF-α、IL-6、生长因子TGF-β1、bFGF能力,并与PBMCs、皮肤成纤维细胞(sFb)进行比较,从而对其进行功能鉴定。
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