论文部分内容阅读
目的：通过实验研究探讨针刺风池穴预处理对脑梗死大鼠的脑保护作用及机制.方法：78只雄性成年SD大鼠,随机分为正常组6只,假手术组、脑梗死组、缺血预处理组和针刺预处理组各18只.每组又分为1天、3天、7天三个亚组,每组6只.采用改良Zea Longa方法制备大脑中动脉闭塞脑梗死(MCAO)模型,针刺预处理组于造模前针刺大鼠双侧"风池"穴,连续7天.缺血预处理组于造模前24小时于颈外动脉插入自制线栓,栓塞大脑中动脉后,间断缺血30分钟.各组分别于处死前4小时进行神经功能评分,HE染色检测细胞形态,TUNEL法检测细胞凋亡,Real-time PCR和WestemBlot检测α 7-nAChR、TLR4和NF-κB基因及蛋白的表达.所有数据用均数±标准差((x)±s)表示,spss 19.0版统计软件分析.结果：缺血预处理和针刺预处理均可改善脑梗死后神经功能评分,且优于脑梗死组,P＜ 0.05.HE染色结果显示,脑梗死组细胞形态学发生改变,3天时最重,而缺血预处理组和针刺预处理组各时间点细胞损伤程度均轻于脑梗死组.细胞凋亡结果显示脑梗死组、缺血预处理组和针刺预处理组TUNEl阳性细胞明显多于正常组和假手术组,P＜ 0.01.各组于1天时阳性细胞数明显升高,3天达高峰,7天时开始下降,缺血预处理组和针刺预处理组各时间点TUNEl阳性细胞多于脑梗死组,P＜ 0.01.Real-time PCR检测结果显示1天和3天时假手术组、脑梗死组、缺血预处理组和针刺预处理组a7-nAchRmRNA表达下调.缺血预处理组和针刺预处理组a7-nAchRmRNA表达高于脑梗死组,P＜0.01.7天时各组间比较,差异无统计学意义,P＞0.05.脑梗死后1天和3天时假手术组、脑梗死组、缺血预处理组和针刺预处理组TLR4mRNA和NF-κB mRNA表达上调.缺血预处理组和针刺预处理组TLR4mRNA和NF-κB mRNA表达低于脑梗死组,P＜ 0.05.脑梗死7天时各组间TLR4mRNA和NF-κBmRNA表达无显著性差异,P＞0.05.WesternBlot结果显示：假手术组、脑梗死组、缺血预处理组和针刺预处理组a7-nAChR蛋白表达下降、TLR4和NF-κB蛋白表达升高,与正常组比较,差异均有统计学意义,P＜0.01.缺血预处理组和针刺预处理组a7-nAChR蛋白表达高于脑梗死组,TLR4和NF-κB蛋白表达低于脑梗死组,P＜ 0.01.结论：1、针刺风池穴预处理可以改善脑梗死大鼠神经功能,使神经细胞损伤减轻,抑制细胞凋亡,具有与缺血预处理类似的脑保护作用.2、针刺风池穴预处理可以上调a7-nAChR基因和蛋白的表达,下调TLR4和NF-κB基因和蛋白的表达.