姜黄素对固醇调控通路SREBP、SCAP、Insig2间相互作用的影响

来源 :2014年第十二届全国脂质与脂蛋白学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiqing
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目的:通过研究姜黄素对固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)与固醇调节元件结合蛋白(SREBP)、胰岛素诱导基因(Insig2)互作的影响,探寻姜黄素降胆固醇作用的分子机理.方法:构建目的蛋白与荧光蛋白融合基因载体pCFPSCAP、pYFPInsig2、pDsRedSREBP,分别共转染HepG2细胞,建立HepG2/CFPS CAP ·YFPInsig2和HepG2/CFPS CAP·DsRedSREBP共转染细胞.培养共转染细胞,并分为空白对照组,不加任何药物,完全培养基培养;阳性对照组,无血清培养基+10%无脂血清(LPDS)共孵育;模型组,无血清培养基+20μg/mL LDL;三组药物处理组,无血清培养基+20μg/mL LDL,同时分别加入5、10、20mmol/L的姜黄素.采用激光共聚焦显微镜和荧光蛋白漂白技术测定不同处理组CFP·YFP或CFP·DsRed间的FRET效率.
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