miRNA-143靶向调控HECTD1表达介导肺成纤维细胞迁移

来源 :第十四届全国劳动卫生与职业病学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luyang123456
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  目的:探讨miRNA-143/HECTD1 调控轴在成纤维细胞迁移中发挥的作用,为矽肺纤维化的治疗提供新的思路.方法:取生长对数期的小鼠成纤维细胞(L929)进行SiO2(50μg/cm2)处理0-72h.MTT 法检测细胞活力变化;蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测蛋白表达;miRNA-143 慢病毒转染L929 细胞,敲除/上调miRNA-143;实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)测定miRNA-143 在L929 细胞中的表达情况;细胞划痕实验评估L929 细胞迁移能力的变化.结果:与对照组相比,SiO2 处理L929 细胞0-72h,其中6h、12h 细胞活力略微降低,但差异无统计学意义(P>0.05),HECTD1 蛋白表达呈随时间依赖性降低,48h 降到最低值,差异显著具有统计学意义(P<0.05);qRT-PCR 结果显示miRNA-143 在SiO2 处理L929 细胞1h 后达到峰值并持续到3h,差异有统计学意义(P<0.05);anti-143 降低HECTD1 表达,同时促进L929 细胞迁移,mimic-143 增加HECTD1表达,同时降低L929 细胞迁移,差异有统计学意义(P<0.05).结论:miRNA-143 经靶向调控HECTD1 表达,进而参与成纤维细胞迁移功能的改变.
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