【摘 要】
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利用一对自行设计的引物,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),从ConA诱导的5周龄SPF鸡脾细胞中扩增出鸡白细胞介素2(IL-2)基因片段,其长充为439bp,经酶切鉴定,初步确认为鸡IL-2基因.再将该IL-2基因片段定向插入真核表达质粒pcDNA3中,经DNA序列鉴定,表明构建的重组质粒含有IL-2基因,该基因的cDNA序列与Sundick报道的结果基本一致.此外,将IL-2基因片段插入
【机 构】
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安徽农业大学畜牧水产学院(合肥) 中国科学技术大学生命科学学院(合肥)
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会
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利用一对自行设计的引物,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),从ConA诱导的5周龄SPF鸡脾细胞中扩增出鸡白细胞介素2(IL-2)基因片段,其长充为439bp,经酶切鉴定,初步确认为鸡IL-2基因.再将该IL-2基因片段定向插入真核表达质粒pcDNA3中,经DNA序列鉴定,表明构建的重组质粒含有IL-2基因,该基因的cDNA序列与Sundick报道的结果基本一致.此外,将IL-2基因片段插入原核表达载pGEX-4T-1,并导入菌株BL21,经诱导培养、蛋白提取和SDS-PAGE,获得分子量约为50kD的蛋白条带,表明所克隆的鸡IL-2基因在原核细胞中得到表达.
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