【摘 要】
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目的：优化诺如病毒RT-PCR检测中的四对常用引物的反应条件，筛选适合贝类中诺如病毒检测的最佳引物。方法：运用正交试验设计法，对影响病毒扩增的主要因素进行优化设计，通过RT-PCR 扩增、凝胶电泳检测确定引物最佳反应条件，通过对比四对引物特异性与灵敏度确定检测贝类中诺如病毒的最佳引物。结论：四对引物JV13I/JV12Y、289H/290J、COG2F/COG2R、SKF/SKR的最优体系中MgC
【机 构】
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温州市农业科学研究院食品所，温州 325006 温州市农业科学研究院
【出 处】
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第五届全国农产品加工科研院所联谊会暨中国农产品加工技术与产业发展研讨会
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目的：优化诺如病毒RT-PCR检测中的四对常用引物的反应条件，筛选适合贝类中诺如病毒检测的最佳引物。
方法：运用正交试验设计法，对影响病毒扩增的主要因素进行优化设计，通过RT-PCR 扩增、凝胶电泳检测确定引物最佳反应条件，通过对比四对引物特异性与灵敏度确定检测贝类中诺如病毒的最佳引物。
结论：四对引物JV13I/JV12Y、289H/290J、COG2F/COG2R、SKF/SKR的最优体系中MgCl2浓度分别2.0 mmol/L、1.0 mmol/L、1.0 mmol/L、1.0 mmol/L，Taq酶分别为0.5 U、0.5 U、0.5 U、1.5 U，引物浓度分别为0.4μmol/L、0.3μmol/L、0.3.μmol/L、0.5μmol/L，引物JV13I/JV12Y更适宜检测贝类样品。
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