【摘 要】
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目的:优选虫草蛋白的最佳提取方法.方法:以凉山虫草为实验材料,采用三种提取方法(均浆法、液氮研磨法、组织分散法)分别对虫草蛋白进行提取,通过Bradford法含量测定和SDS-P
【机 构】
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成都中医药大学,中药材标准化教育部重点实验室,成都610075
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目的:优选虫草蛋白的最佳提取方法.方法:以凉山虫草为实验材料,采用三种提取方法(均浆法、液氮研磨法、组织分散法)分别对虫草蛋白进行提取,通过Bradford法含量测定和SDS-PAGE电泳图谱对比分析,筛选最佳提取方法;采用酸性、中性、碱性三种提取缓冲液,通过Bradford法含量测定和SDS-PAGE电泳图谱对比分析,筛选最佳提取溶剂;采用正交试验设计,考察辅助试剂(抗氧化剂、表面活性剂等)对提取得率的影响,优化最佳辅助试剂加入量.结果:经过试验数据分析,得出最佳提取方法为液氮研磨粉碎,中性PBS缓冲液(pH7.3,含0.2%巯基乙醇和0.5% Tween80)为提取溶剂,浸提时间4小时.结论:优选得到的提取方法简便易行,提取效率高,适合进行下一步蛋白质分析.
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