荔枝TPEC与龙眼EC原生质体电融合参数研究

来源 :中国园艺学会热带南亚热带果树分会第二届学术研讨会暨全国龙眼产业发展论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jinr0op8
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本研究以荔枝转基因原生质体再生的胚性愈伤组织(Embryogenic callus derived from transgenic protoplasts,TPEC)细胞系和龙眼红核子品种的松散型胚性愈伤组织(Embryogenic callus EC)为材料,采用PA-4000电融合仪进行原生质体电融合参数的研究.本研究结果表明:荔枝TPEC与龙眼EC原生质体融合的适宜电融合参数为原生质体密度为5×105个·mL-1时,在交流电场的频率为1.0 Mhz、交变电场场强为50V·cm-1,作用时间为60 s,直流脉冲强度为600 V·cm-1、脉冲持续时间为10 ms,脉冲2-3次,融合率可达30%以上.
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以沙糖桔为材料,在果实膨大期通过去果处理降低库力,同时设留果对照,通过环剥一年生春梢结果枝和保留相同数量叶片严格控制库-源关系,并对源叶净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)等叶片光合特性进行比较研究,探讨去果处理改变库-源关系后对沙糖桔叶片光合特性的影响.结果表明:①去果显著降低沙糖桔叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr),而对饱间CO2浓度(Ci)、气孔限
mRNA差异显示技术是鉴别基因差异表达方法之一,已在生物技术相关领域中广泛应用.本文介绍了mRNA差异显示技术的概况、基本原理及主要优缺点,比较详细地综述了该技术在园艺植物生物技术方面的最新应用情况和取得的研究结果.
柑橘溃疡病(citrus bacterial canker disease)是由地毯黄单胞杆菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.citri)引起的一种世界性检疫性病害,病原基因pthA是柑橘溃疡病亚洲型(A型)致病所必需的因子,其中3个核定位信号区是PthA的重要功能区,在寄主细胞内起识别定位的作用.本研究将pthA的核定位信号NLSs构建正义和反义基因,导入柑橘感
本研究以荔枝幼胚来源的胚性愈伤组织作为受体材料,采用基因枪轰击的方法进行gus基因转化,对荔枝胚性愈伤组织基因枪轰击中各影响因素进行了对比研究,确定了进行荔枝基因枪轰击的最佳轰击条件.采用此最佳轰击条件进行稳定表达转化,经50mg/L的潮霉素筛选获得抗性愈伤组织,并通过体胚发生途径获得了再生植株,经GUS组织化学染色初步确定为表达GUS的转基因植株.
概述了目前分子生物学方法在龙眼种质资源上的应用,包括其核酸提取的方法、分子标记(RAPD、AFLP及SRAP)等在品种鉴定、分类、遗传多样性的应用,胚胎发育、成花等功能基因的分离、鉴定及其转化研究.针对龙眼的分子生物学研究现状存在的问题包括生物技术育种和系统演化研究,提出了今后龙眼种质资源的重点和发展方向.
以3种不同类型的荔枝TREC为材料,通过优化其体胚发生条件,建立荔枝TREC体胚高频率发生再生系统.结果表明,附加适量的ZT的MS培养基适合作为荔枝TREC诱导体胚发生的培养基;同时附加低浓度2,4-D(0.2 mg·L-1)的MS培养基能诱导荔枝TREC高频率的体细胞胚胎发生,结合接种量控制.可部分替代ZT在荔枝TREC体胚发生中的作用.正常成熟后的体胚,在强光照下可以萌发成苗.
以香蕉(Musa spp.)品种“天宝蕉”(Musa spp.,AAA类群)为试验材料,采用根癌农杆菌介导法对香蕉遗传转化体系进行了较为全面的研究,并以该系统进行了ACS反义基因转化香蕉的研究.结果表明,不经预培养的香蕉茎尖横切薄片,侵染前用附加0.1 mg.L-1甘露醇的高渗固体培养基前处理4h,农杆菌重悬液浓度为OD6001.0左右,重悬液中含100 g.L-1的蔗糖,接菌时间为10~15 m
本研究以采用基因枪转化法,将外源htp和gus(uid A)基因转入荔枝(Litchi chinensis Soon.)晚熟优良品种‘下番枝’,并经筛选得到的荔枝转基因抗性胚性愈伤组织(Transgenic resistant embryogenic calli,TREC)细胞系为材料,进行高频率原生质体再生培养和体胚发生研究.研究结果表明:荔枝转基因抗性胚性愈伤组织分离的原生质体,在M12培养基
如何提高转化效率是植物遗传转化中的一个关键问题.本文以香蕉(Musa spp.)的横切薄层切片(tTCL)外植体作为转化受体,通过测定GUS基因瞬时表达率,对影响根癌农杆菌转化香蕉的因素进行了研究,为提高转化效率提供前提.