肠出血性大肠杆菌O157:H7Tir基因的克隆、表达及生物学活性研究

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wwwww1980wwwww
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克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7转位紧密素受体(Tir)基因,并研究其抗原性。选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效表达。以Tir免疫家兔获得了高效价多克隆抗体,Western blot分析此抗体能与Tir发生特异性抗原抗体反应。选用Hep-2细胞对Tir重组蛋白进行粘附特性分析,表达Tir蛋白能够抑制O157:H7对Hep-2细胞的粘附。表达Tir蛋白免疫Balb/c小鼠,并进行攻毒保护评价,结果显示表达Tir蛋白具有良好的免疫原性和反应性和一定的免疫保护性。在大肠杆菌中成功克隆表达了Tir基因,所获Tir具有良好的抗原性,可能用于肠出血性大肠杆菌O157基因工程疫苗的研究。
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