【摘 要】
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高致病性猪蓝耳病是目前危害我国养猪业的主要传染病,本研究以高致病性PRRSV亲本毒HuN4株及其传代致弱的毒株为研究对象,将高致病性PRRSV亲本毒HuN4株在Marc145细胞上进行连
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高致病性猪蓝耳病是目前危害我国养猪业的主要传染病,本研究以高致病性PRRSV亲本毒HuN4株及其传代致弱的毒株为研究对象,将高致病性PRRSV亲本毒HuN4株在Marc145细胞上进行连续100次以上传代致弱,并对PRRSV强毒HuN4株及其不同传代致弱的毒株进行核苷酸及氨基酸遗传变异分析,结果发现亲本毒在连续传代过程中,在非结构蛋白编码区和结构蛋白编码区均有氨基酸的突变,但是发生突变的氨基酸比较分散,其中突变最多的主要集中在ORF1a和ORF1b复制酶基因区域,其中ORF1a基因中发生突变的氨基酸主要在NSP2蛋白,占ORF1a基因突变氨基酸的61.5%,ORF1b基因发生突变的氨基酸主要在NSP9、NSP11和NSP12蛋白.在结构蛋白区域氨基酸突变较少,其中氨基酸稳定遗传的是ORF7编码的核衣壳蛋白,即使传至100代以上,也未发生氨基酸的突变或缺失、插入等现象.亲本毒HuN4株在传至F84代时突变率达到了最高,发生突变的氨基酸达到了35个,从F85代以后基本氨基酸遗传性能趋于稳定,当传至F100代以后,氨基酸遗传性能基本稳定,从F100代到F112代仅发生2个氨基酸的突变,其氨基酸突变率仅为0.03%。分析结果显示高致病性PRRSV亲本毒HuN4株在传代致弱过程中,F84代以前中间代次的各个毒株氨基酸仍然可以继续发生突变,具有遗传性能的不稳定性,F84代以后其氨基酸突变率降低,基本趋于平衡,而经过传代致弱F100代以后的毒株其生物学遗传性能更加趋于稳定,适合于作为候选的弱毒疫苗株.
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