长波紫外线辐射人真皮成纤维细胞光损伤模型的建立

来源 :中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhengzheng369
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  目的 长波紫外线(UVA)是紫外线中损伤人真皮成纤维细胞(HDF)的主要成分,目前尚未建立细胞水平的损伤模型.本研究拟了解UVA辐射剂量与HDF损伤程度的关系以及细胞活性、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)等指标的变化情况,为建立UVA辐射HDF光损伤模型提供客观、可靠的观察指标和操作性强的实验方法.方法 用UVA低、中、高剂量(4.5、9、18J/cm2)对HDF进行辐射,24 h后,采用MTT比色法检测UVA细胞活力;应用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测HDF细胞上清液中MMP-1的含量;应用生化方法测定HDF细胞上清液中SOD总活力和MDA含量.结果辐射后24 h:UVA辐射HDF的半数有效量(EC50)为16.6 J/cm2,相关系数r为0.88(P<0.01);与对照组相比,中、高剂量组HDF上清液中的MMP-1分泌量分别增加了12.52%和32.30%(P<0.01).低、中剂量组HDF上清液中的SOD总活力与对照组比较,分别增加了16.6%和9.5%(P值均<0.01);而高剂量组SOD总活力则降至对照组水平;同时,HDF上清液中MDA的含量随照射剂量的增加而增加,低剂量组含量为对照组的3.7倍,中剂量组为对照组的4.9倍,高剂量组为对照组的5.4倍(P值均<0.01).结论 UVA辐射HDF的EC50为16.6 J/cm2,照射后24 h为检测指标的最佳时间,细胞存活率、MMP-1、SOD以及MDA是UVA辐射HDF损伤程度较为可靠的检测指标.
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