神经干细胞向胶质瘤干细胞迁移并抑制其生长

来源 :2011金陵神经肿瘤国际论坛暨2011中国胶质肿瘤协作组学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangyingygp
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目的:探讨神经干细胞(NSC)向胶质瘤干细胞(GSC)迁移的机制及对其干细胞表型和生长的影响。方法:干细胞条件下悬浮神经球发培养U251和原代胶质瘤干细胞,并以含血清培养基对其进行诱导分化;以免疫荧光法、流式细胞术、Western B1ot以及RT—PCR对其进行相关鉴定;收集胶质瘤干细胞(U251-SC和原代GSC)及其分化细胞条件培养液(CM),以Transwell小室法检测其对神经干细胞迁移的趋化作用。ELISA法检测条件培养液中VEGF、bFGF的分泌水平,并以EGF、bFGF为对照分析条件培养液对NSC的化学趋化作用;进一步以Dio和Dil分别标记NSC和GSC,体外混合培养观察NSC向GSC的迁移、以及对肿瘤干细胞球生长的影响。以Transwell小室法共培养NSC与GSC,流式细胞术、Western Blot和RT-PCR检测共培养前后胶质瘤干细胞表型变化;以有限稀释法96孔板细胞梯度成球来检测共培养前后胶质瘤干细胞自我更新能力差异;进步分同侧和对侧将NSC与GSC同时原位种植裸鼠颅内,观察活体颅内NSC向GSC的迁移及对裸鼠存活时间的影响。
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近年来,有关胶质瘤的相关基因研究取得了很大的进展。第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homology deleted onchromosome ten,PTEN)为具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因,它不仅表现出抑癌基因的特性,而且还具有磷酸酶活性,通过其脂质磷酸酶和蛋白磷酸酶的作用对细胞内蛋白质磷酸化水平进行精细调节,影响细胞的生长、增殖、
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胶质瘤(glioma)是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,在成人其发生率约占颅内肿瘤的一半。尽管手术、放射治疗及化学治疗等治疗手段现在已取得不少的进步。但对恶性胶质瘤的治疗效果仍然不佳。pygopus基因是近年新发现的wnt信号系统中重要功能蛋白。Pygopus在哺乳动物含有两个同源结构体,即Pygol和pygo2。已有的研究结果表明pygo2与wnt信号及多种恶性肿瘤发生密切相关,目前该基因与脑胶质
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