【摘 要】
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目的：研究灸法适宜温热刺激对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)延缓衰老物质表达的影响,为研究灸法适宜温热刺激后启动"延缓衰老"效应提供了实验和理论依据.方法：原代HUVECs分
【机 构】
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贵阳中医学院针灸推拿学院,贵阳550025
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目的：研究灸法适宜温热刺激对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)延缓衰老物质表达的影响,为研究灸法适宜温热刺激后启动"延缓衰老"效应提供了实验和理论依据.方法：原代HUVECs分为正常组(37℃)和适宜温热刺激组(40℃),适宜温热刺激组置于40℃培养箱刺激30min,每天2次,各组于第1天、2天、3天刺激结束4～6h后用MTT比色法检测HUVECs生长活力,第3天应用实时定量多聚酶链反应(Quantitative Polymerase chain reaction,QPCR)检测HUVECs中P53、SIRT1和E2F1的mRNA,蛋白免疫印迹实验(Westemblot,WB)技术检测HUVECs中P53、SIRT1和E2F1的蛋白质表达情况,正常组不做任何处理,但在同一时间段予以相应指标检测.结果：两组HUVECS生长活力逐渐增强,与第1天和第2天比差异均有统计学意义(P＜0.001)；每天适宜温热刺激组细胞生长活力较正常组强,差异均有统计学意义(P＜0.01,0.001).第3天,P53的mRNA及蛋白表达均下降,与正常组比差异有统计学意义(P＜0.01)；E2F1的mRNA及蛋白表达均上调,与正常组比差异有统计学意义(P＜0.05)；SIRT1的mRNA及蛋白表达均上调,与正常组比差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论：灸法温热刺激能够调控人脐静脉血管内皮细胞的延缓衰老相关物质基因和蛋白的表达,这为我们研究灸法温热刺激发挥"延缓衰老"生物学效应提供了实验依据.
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