赫氏艾密里藻(Emiliania huxleyi)颗石粒(coccolith)的原子力显微(Atomic Force Microscopy,AFM)分析方法初探

来源 :2015海峡两岸海洋生物多样性研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangxiaojuan
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  颗石藻(coccolithophore)作为一种模式生物在重建古海洋气候、环境和预测未来全球气候变化中起了很重要的作用,赫氏艾密里藻(Emiliania huxleyi)是颗石藻最为典型的代表种.钙质颗石粒(coccolith)是颗石藻形态分类的主要依据,有着非常精细和复杂的结构,其在样品收集过程中很容易遭到破坏,是鉴定颗石藻经常会遇到的一个技术问题.由于国际尚无统一的颗石藻定量采样和样品分析方法,本文采用原子力显微镜(Atomic Force Microscopy,AFM)对赫氏艾密里藻的颗石粒形态进行超显微观察与研究,获取不同扫描范围的高度图(height image)和形貌图(deflection image)以此观测其形态结构,并建立了针对颗石藻的原子力显微分析样品制备方法:通过离心与膜过滤两种方法收集赫氏艾密里藻,比较得出了一种简单、快速的适合于观测颗石藻在大气环境中成像的样品处理、制备和图像采集方法:3000~4000 rpm,20℃离心5 min,收集颗石藻细胞,去除有机杂质取白色沉淀,将沉淀物悬浮于0.05 M NH4HCO3溶液中,再取少许悬浮液滴加于盖玻片表面,20℃晾干后于样品台在AFM接触模式(contact mode)下原子级扫描,扫描范围50 μm,频率1Hz,可以得到优质的颗石粒形态图像,有助于颗石藻的分类鉴别.
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