【摘 要】
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目的：利用睾丸体外培养方法探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)暴露对小鼠睾丸睾酮合成及基因表达的影响,探讨相关的分子机制.方法：用浸浴式一次性通气旋转装置体外培养
【机 构】
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四川大学华西公共卫生学院营养与食品卫生教研室
【出 处】
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四川省营养学会2012年学术年会暨妇幼营养专题研讨会
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目的：利用睾丸体外培养方法探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)暴露对小鼠睾丸睾酮合成及基因表达的影响,探讨相关的分子机制.方法：用浸浴式一次性通气旋转装置体外培养小鼠睾丸.实验共分1个DMSO溶剂对照组和0.1μM、1μM、10μM、100μM 4个DEHP剂量组.培养72h,每24h通气一次.HE染色切片观察睾丸组织形态学,判断DEHP对体外培养的睾丸组织有无病理学改变.放射免疫法测定收集培养基的睾酮水平,免疫组织化学法测定睾丸组织蛋白表达水平,Elisa法测定收集培养基INHBβ水平,实时荧光定量PCR检测睾丸组织基因表达水平.结果：睾丸组织切片HE染色,与DMSO对照组比较,DEHP暴露各剂量组在各类型细胞的形态、比例等几方面观察,未观察到明显病理学改变.睾酮测定与DMSO对照组相比,培养睾丸组织睾酮的合成量表现出先增加后降低的趋势.一定范围内,睾酮合成增加,尤其是在10μM剂量组增加最明显,从100μM剂量组开始睾酮合成减少.免疫组织化学测定与DMSO对照组相比,间质细胞蛋白3β-HSD、P450C17、P450Scc表达增强,支持细胞蛋白vimentin表达减弱,尤其是在10μM、100μM两个剂量组增强明显(P＜0.05).荧光定量PCR与DMSO对照组相比,3β-HSD、P450C17、P450Scc、vimentin mRNA表达下降,尤其是100μM剂量组下降明显(P＜0.05),INHBβ mRNA表达无显著变化.Elisa测定INHB β的合成量表现为低剂量增加高剂量减少的趋势,在0.1μM、1μM剂量组合成增加,从10μM剂量组开始合成减少.结论：DEHP暴露对体外培养睾丸的睾酮合成和相关功能基因3β-HSD、P450C17、P450Scc、vimentin的表达有影响,其分子机制与这些因素的调控有关.
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