【摘 要】
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本研究为构建能利用木糖产乙醇的酵母工程菌,将来自嗜热放线菌Thermobifida fusca的木糖异构酶(xylose isomerase,XI)基因xylA,连接于酵母表达载体pYES2的半乳糖诱导的启动子
【机 构】
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广西科学院国家非粮生物质能工程技术研究中心 南宁 530007 广西大学 南宁 530003
【出 处】
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2009年全国博士生学术会议——泛北部湾地区亚热带生物资料的综合开发与利用
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本研究为构建能利用木糖产乙醇的酵母工程菌,将来自嗜热放线菌Thermobifida fusca的木糖异构酶(xylose isomerase,XI)基因xylA,连接于酵母表达载体pYES2的半乳糖诱导的启动子(PGAL)下,得到重组质粒pYES2-xylA,转化酵母菌INVScl。重组酵母菌株INVScl-xylA的木糖异构酶活性测定表明,木糖异构酶在75℃,pH6.8的酶活力为46U/mL,木糖异构酶在酿酒酵母中得到活性表达。SDS-PAGE电泳结果显示出明显的特异性表达产物带,单体分子量为43kD。木糖、葡萄糖共发酵结果表明,工程菌INVScl-xylA消耗木糖和产生乙醇分别比对照菌提高53.8%和36%。本文从嗜热放线菌中克隆木糖异构酶并将其在酵母中实现活性表达,提高酵母菌消耗木糖酒精转化率。
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