【摘 要】
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目的:比较逆转录病毒直接感染和脂质体介导转染神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)的不同效率,观察外源转入的酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)基因在神经干细胞内的
【机 构】
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重庆市第三军医大学附属新桥医院神经外科(重庆)
【出 处】
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2001年老年性痴呆和帕金森国际学术会议
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目的:比较逆转录病毒直接感染和脂质体介导转染神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)的不同效率,观察外源转入的酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)基因在神经干细胞内的表达.方法:将NSCs从胚胎16天(Embryonicday16,E16)Wistar大鼠前脑室老家膜下周围区分离、鉴定、培养;收集PA317包装生产的含有由缺陷性逆转录病毒载体N2A携带TH基因的逆转录病毒颗粒,采用直接感染和DOTAP脂质体介导TH-N2A转染体外培养的NSCs方法,经G418筛选,比较NSCs在两种不同转染方法的下的存活量;诱导NSCs分化,并在子代细胞内检测外源TH基因的表达.结果:两种方法都可以有效地将TH-N2A转入NSCs内,逆转录病毒感染组的存活的神经干细胞数明显多于DOTAP脂质体介导转染组;两种方法处理后,NSCs的分化细胞中都可以检测到TH的表达,TH阳性细胞数的比例在两组间没有差异.结论:逆转录病毒感染或者脂质体介导转染都可以将TH基因转入NSCs内,逆转录病毒感染的转染效率更高,不同转染方法不影响TH在分化细胞中的表达.
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