目前研究表明,血蓝蛋白是一种具有多种免疫学活性的多功能蛋白。本研究从体外水平分析了凡纳滨对虾血蓝蛋白的抗肿瘤活性及其作用机制。结果发现,HeLa细胞经10-50ug/ml血蓝蛋白处理后,与对照组293T细胞相比其生长受到明显抑制。显微镜下观察发现,实验组细胞发生明显的皱缩,变圆,并伴有大量凋亡小体的出现,随血蓝蛋白浓度的增加凋亡小体数量增多。DNA ladder结果显示,实验组DNA在180和300bp左右的地方呈现明显的梯状条带。继而,运用2-DE技术从实验组细胞中成功鉴定出10个与对照组存在显著差异的蛋白点。经RT-PCR验证,其中线粒体热休克蛋白60 kD、70 kD热休克蛋白前体、14-3-3蛋白ζ/δ和90kD热休克蛋白表达水平分别上调1.16、1.74、1.46、1.62倍,Ran蛋白下调1.38倍,与质谱鉴定结果相一致。在此基础之上,进一步对实验组细胞中的活性氧、线粒体膜电位和Caspase9/3酶活的变化情况进行检测,发现与对照组相比均存在明显差异。由此推测,凡纳滨对虾血蓝蛋白可能通过线粒体途径诱导HeLa细胞的凋亡,进而发挥抗肿瘤活性。所获研究结果,对彻底揭示对虾血蓝蛋白的免疫防御机制具有重要意义。