【摘 要】
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Hg2+是无机汞最稳定的存在形式,有剧毒而且在环境中不可降解.所以,发展对环境中微量Hg2+的高灵敏、高选择性的检测技术变得尤为重要.本文主要利用T-Hg2+-T的特定结合作用与核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)的信号放大作用,并结合荧光标记探针技术,实现了对水中微量Hg2+的检测.通过与核苷酸中错配的T-T碱基对的特定结合作用,水中Hg2+被嵌入到双链DNA中；核酸外切酶Ⅲ从双链DNA的 3端向5端催化水
【机 构】
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青岛科技大学,青岛市四方区郑州路53号,266042
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Hg2+是无机汞最稳定的存在形式,有剧毒而且在环境中不可降解.所以,发展对环境中微量Hg2+的高灵敏、高选择性的检测技术变得尤为重要.本文主要利用T-Hg2+-T的特定结合作用与核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)的信号放大作用,并结合荧光标记探针技术,实现了对水中微量Hg2+的检测.通过与核苷酸中错配的T-T碱基对的特定结合作用,水中Hg2+被嵌入到双链DNA中；核酸外切酶Ⅲ从双链DNA的 3端向5端催化水解单核苷酸形成两段单链DNA,一段作为T-Hg2+-T的结合原料进入下一次的循环,实现信号放大；另一段可以和磁珠上的探针DNA(Substrate DNA)杂交互补,并在Klenow聚合酶的作用下聚合生长,释放出带标记罗丹明的信号DNA(Signal DNA),进行荧光检测,从而测定Hg2+浓度.在最优实验条件下,荧光的响应信号随Hg2+浓度的增大而增强,其检测最低浓度为2.0×10-10M.
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Survivin mRNA 作为一种特异性抗凋亡抑制因子,其存在或含量变化预示着肿瘤的存在及发展,可为癌症的早期诊断、检测和治疗提供指导。因此,survivin mRNA 已成为肿瘤分子生物学的研究热点之一。可惜的是,在分析化学领域只有极有限的工作涉及到对其的检测分析,因而亟待探寻一种高灵敏度、高有效性的方法用于其检测。
糖蛋白是一类重要的翻译后修饰蛋白,在生物体内种类繁多,分布广泛,与人体中很多重要的生物学过程密切相关[1,2]。因此,对糖蛋白的研究具有十分重要的生物学意义和临床应用价值。通常糖蛋白在复杂生物体系中的绝对丰度都非常低,高丰度非糖蛋白的存在会对低丰度的糖蛋白产生干扰和掩盖。为了获得糖蛋白的质谱图谱,需要对糖蛋白或糖肽进行分离富集[3,4]。
在生物医学领域，尤其对生物标志物的研究，需要更加高效的糖蛋白富集手段[1]。本工作发展了简单、高效制备硼酸聚合刷修饰磁性氧化石墨烯材料的方法，并将材料应用于复杂生物体系中糖蛋白的快速分离。首先通过溶剂热法制备了磁性氧化石墨烯(GO@Fe3O4)纳米复合材料；然后，以1-芘丁醇和2-溴代异丁酰溴合成溴引发剂[2]，利用π-π静电吸附作用，将溴引发剂修饰在GO@Fe3O4的表面；最后，用表面引发自由基
金纳米簇仅包含几个至几百个金原子,其核的尺寸通常小于2纳米,因其存在对电子的限域效应,从而表现出一些类似分子的特性,例如发光现象,近年来受到广泛关注。[1-3]最近,我们发现生物分子半胱胺对于蛋白质包覆的金纳米簇具有强的刻蚀效应,如图1a所示,从而发展了免标记免分离的半胱胺荧光检测方法。[4]进而,通过半胱胺刻蚀方法除去蛋白质壳内的金核,研究了金簇形成时蛋白质壳上酪氨酸残基的交联,发现蛋白质包覆的
室温条件下，合成了基于硼酸功能化聚合物修饰的量子点[1]，应用透射电镜、红外光谱、X射线衍射、X射线光电子能谱等仪器对量子点的形貌及结构组成进行了表征。运用荧光光谱的方法，实现对糖蛋白的分析检测[2]。未加入糖蛋白之前，从量子点到硼酸能发生有效的电子转移，导致荧光发射强度相对较低；加入糖蛋白后，硼酸基团将会与糖蛋白糖基部分结合形成五元环或六元环[3]，从而导致电子转移过程受阻，荧光增强。
本文提出了一种灵敏检测肿瘤细胞中ATP含量的方法.利用酶促循环放大以及聚多巴胺纳米微球的荧光猝灭作用,通过ATP适体特异性识别ATP来引发反应进行,实现高灵敏、高选择性检测肿瘤细胞中的ATP.图1检验了PDANS的猝灭能力,FAM的荧光强度随着PDANS浓度的增加明显降低,当PDANS的浓度增加到0.24 mg/mL时,FAM-DNA的荧光基本被完全猝灭,猝灭效率为94.15％.因此选用0.24
热电极技术是一种只改变电极表面及附近微小区域的温度，而溶液的整体温度保持不变的技术，它的突出优势在于能快速精确的控温。此外，由于其具有提高电化学检测的稳定性，增强检测的灵敏度等优点而广泛应用于电分析化学领域。本文采用金丝制作了直流加热的金盘热电极[1]。
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基因突变是癌症早期诊断与疗效监测的重要标志物(1)。理想情况下,基因突变的检测技术应该具有如下特点：快速简单、一步法、室温检测并且通用性高。但是,现有的检测技术难以兼具上述特点。在本工作中,我们开发了一种基于链迁移动力学的新型核酸荧光探针。探针与完全匹配的突变型DNA结合后会发生链迁移过程,该过程的自由能变化(ΔG)和熵变(ΔS)均为0,转化率为50％；而野生型DNA的链迁移过程中存在单碱基错配,
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