禽类脑研究是脑科学的一部分,脑组织冰冻切片免疫组织化学是脑研究的基础方法,提高其组织切片质量为脑科学研究提供形态学依据具有重要的意义。由于脑组织质地柔软、水分含量较大,难以获得高质量脑组织冰冻切片,本实验建立了一种高质量禽类脑组织冰冻切片法,其组织结构良好,后续免疫组织化学染色结果良好,为禽类脑研究提供了实验基础。目的:为建立高质量、抗原保存良好、可重复性的禽类脑组织冰冻切片法,本研究针对禽类脑组织,对常规固定后组织冰冻切片法的包埋环节进行优化,并设置常规石蜡切片对照,通过苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining,HE）及免疫组织化学技术（streptavidin-perosidase method,SP）对组织结构和抗原保存情况进行评估。材料和方法:采集20日龄SPF鸡小脑、中脑、大脑组织,经4%多聚甲醛固定24h后,使用180 g·L^-1蔗糖溶液脱水3h,继续使用360g·L^-1蔗糖溶液脱水2h。将组织置入OCT包埋剂中,4℃包埋2h,更换新鲜OCT室温1h,制作8um冰冻切片。其余组织行常规石蜡切片。通过免疫组织化学链霉亲和素一生物素过氧化物酶复合物技术和检测小脑Sox2蛋白表达,对新冰冻切片法抗原保存情况进行评估,并以HE染色结果评价其组织结构。结果:改变包埋方法的鸡脑组织冰冻切片,与常规石蜡切片相比,HE染色结果显示组织结构良好,免疫组织化学结果显示Sox2表达于细胞核,与其他研究报道相同。结果表明,通过延长OCT包埋时间和次数,可获得组织结构、抗原保存良好的脑组织冰冻切片。结论:通过改良冰冻切片包埋程序,组织与包埋剂充分融合,使组织内水分减少,冷冻而形成的冰晶问题得到解决。建立的高质量勤禽类脑冰冻切片法,实验可重复性高,组织结构、抗原保存良好,为脑研究奠定实验基础。