【摘 要】
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几丁质是昆虫表皮和中肠围食膜的主要成分,昆虫的生长发育依赖于体内几丁质合成和降解的精确控制.几丁质脱乙酰酶(chitin deacetylase,CDA)是几丁质降解系成员之一,调节昆虫的行为、变态发育以及生殖等.本研究以重要仓储害虫烟草甲[Lasioderma serricorne (Fabricius)]为研究对象,在前期转录组测序的基础上,利用RT-PCR技术克隆了烟草甲CDA1基因的cDN
【机 构】
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贵阳学院生物与环境工程学院,有害生物控制与资源利用贵州省高校特色重点实验室,贵阳550005
【出 处】
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中国植物保护学会第十二次全国会员代表大会暨2017年学术年会
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几丁质是昆虫表皮和中肠围食膜的主要成分,昆虫的生长发育依赖于体内几丁质合成和降解的精确控制.几丁质脱乙酰酶(chitin deacetylase,CDA)是几丁质降解系成员之一,调节昆虫的行为、变态发育以及生殖等.本研究以重要仓储害虫烟草甲[Lasioderma serricorne (Fabricius)]为研究对象,在前期转录组测序的基础上,利用RT-PCR技术克隆了烟草甲CDA1基因的cDNA全长序列,命名为LsCDA1.该基因的开放阅读框为1 614bp,编码537个氨基酸,预测蛋白质分子量为61.07ku,等电点为4.78.通过氨基酸同源性分析表明,LsCDA1具有ChBD、LDLa和CDA三个保守结构域,并与其他昆虫CDA1具有较高的氨基酸相似性.实时定量PCR分析表明,LsCDA1基因在不同发育阶段的烟草甲中表达量差异显著,其中在高龄幼虫、蛹期表达量较高.LsCDA1基因在高龄幼虫的表皮、中肠和脂肪体均可表达,其中以表皮的表达水平最高.此外,20-Hydroxyecdyone处理可诱导LsCDA1基因的表达,说明该基因可能参与了烟草甲体内的激素调节.RNA干扰结果显示,烟草甲高龄幼虫注射该基因的dsRNA后,LsCDA1基因的表达量降低了87％.试虫在生长发育过程中出现蜕皮时间延迟、表皮黑化、无法完成蜕皮或腹部皱缩死亡等现象.研究结果为深入分析烟草甲CDA1的功能奠定了基础,并为研究环境友好型杀虫剂提供新的候选靶标和依据.
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