【摘 要】
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由土传病原真菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani K(u|¨)hn,有性态Thanatephorus cucumeris(Frank)Donk)引起的水稻纹枯病(Rice sheath blight)是一种重要的水稻病害。G蛋白β
【机 构】
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华南农业大学资源环境学院植物病理学系;
【基金项目】
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国家公益性行业(农业)科研专项经费资助项目(nyhyzx3-16)
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由土传病原真菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani K(u|¨)hn,有性态Thanatephorus cucumeris(Frank)Donk)引起的水稻纹枯病(Rice sheath blight)是一种重要的水稻病害。G蛋白β亚基作为重要的信号传导因子,在植物病原真菌的致病过程中起着重要作用。为了研究立枯丝核菌G蛋白β亚基基因(G-protein beta-subunit ofrice R.solani,简称gpbrrs1)的功能,本研究以水稻纹枯病菌(R.solani AG-1 IA)强致病力菌株GD-118为研究材料,根据同源物种G蛋白β亚基基因序列设计特异引物,利用PCR和RT-PCR技术克隆gpbrrs1基因的gDNA和cDNA序列,确定该基因全长为1811 bp,含有4个内含子和5个外显子,开放阅读框长1047 bp,编码348氨基酸残基,预测的蛋白质分子量为38.23kDa,等电点为6.59。以gpbrrs1序列为模版,构建了启动子为TrpC的真菌沉默(RNAi)载体pSilent-1-Gβ,通过PEG介导的原生质体遗传转化体系实现了转化并获得了转化子,以PCR和RT-PCR方法对转化子进行了抗潮霉素基因的检测,结果表明该RNAi质粒已整合到水稻纹枯病菌的基因组中,而且所获得的转化子在致病力、菌丝生长速率、产菌核能力、多聚半乳糖醛酸酶和聚果胶甲基半乳糖醛酸酶活性方面都比野生型菌株有所降低或减少。
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