抗血小板糖蛋白lib/Ⅲa Fab抗体的原核表达及其生物活性

来源 :第二届世界华人临床生化和检验医学大会暨第六届全国检验医学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zmdwfh2008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究从分泌单克隆抗体(mAb)P140的杂交瘤细胞株中提取总RNA,通过反转录PCR,应用抗体基因的特异性引物,扩增到抗体轻链基因和重链Fd段基因,并成功地构建了重组原核表达载体p3MH/140κ-Fd.将其转化 XLI-Blue菌后获得高效可溶性表达,纯化表达产物P140 Fab具有人血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa特异性结合的活性,为其进一步临床应用创造了有利条件.
其他文献
慢性失血是缺铁性贫血(IDA)首要的病因之一,而胃肠道溃疡和恶性肿瘤常常引起慢性失血.由于传统的实验室指标如血清铁(SI)、转铁蛋白(Tf)/总铁结合力、转铁蛋白饱和度(TS)和血清铁蛋白(Fer)等难能区分IDA的病因,医生常需对IDA患者进行全面的胃肠道检查.这不仅加大了病人的痛苦,也延误了疾病的诊断.因此,探索高灵敏、高特异、无创伤或创伤性小的铁状况实验室检查方法对铁缺乏的诊断极为重要.近年
腺苷脱氨酶(ADA)广泛分布于人体各组织中,在嘌呤核苷酸代谢中起重要作用,近年来在临床疾病实验诊断中的应用日趋广泛,如结核性胸膜炎、结核性腹膜炎、肝病及肿瘤的辅助诊断.目前国内测定ADA的主要方法为ADA催化腺嘌呤核苷水解产生次黄嘌呤和氨,然后用波氏显色反应测定反应过程中产生的氨量来计算标本中的ADA活性,此法只适用于手工操作,反应时间长,干扰因素多,难以获得快速而准确的结果.我们建立了双试剂酶联
传统观念认为胆红素是人体内的一种有害物质,临床上一直将测定血清中的胆红素含量作为诊断肝、胆、胰等疾病的重要指标.近年研究发现,血红素氧合酶/一氧化碳-胆红素(HO-CO-胆红素)系统具有重要的病理生理作用.胆红素不仅是体内的一种代谢产物,它还是一种内源性强抗氧化剂.在一定的浓度下,在心、脑、肝脏以及动脉粥样硬化的发生中具有重要的生理作用.国外有文献报道,血清中胆红素浓度减低是诱发冠心病的一个重要参
血栓前体蛋白(Thrombus Precursor Precursor Protein TpP)是高分子量可溶性纤维蛋白多聚体,是不溶性纤维蛋白的直接前体.当聚合反应不断进行时,可溶性纤维蛋白多聚体转化为不溶性纤维蛋白而成为血栓的一部分.1993年 Gargan 等报道应用无抗原技术获得TpP特异性单克隆抗体,以后又被美国生物遗传科学有限公司制成ELISA试剂盒,并或得FDA批准.目前国内外的报道
血液流变学是研究血液及其成分的流动性与形变规律的一门科学,是运用物理和化学的手段对血液的流变特性进行研究.本文通过对350例体检者血液变学的高、中、低切全血粘度与红细胞压积、血脂成分、血糖进行相关性分析,以探讨他们之间的相互关系及影响因素.
血栓性脑病是严重威胁人类健康的疾病,研究表明其发病机制与高脂血症、血小板活化及活化循环血小板增高有密切关系.近年来发展的流式细胞术(FCM)测定活化血小板膜糖蛋白为评价血小板在体内的活化程度提供了准确特异性的指标.我们于2002年1月至2003年5月参考国外文献,首次建立了全血法测定血小板微颗粒PMP的方法,同时检测血小板膜GPⅡb/Ⅲa和血小板聚集率,及患者血脂水平,探讨其在血栓性脑病中的临床价
妊高征(pregnancy-induced hypertension,PIH)是导致孕产妇和围产儿患病率和死亡率升高的重要原因之一.近年来,人们对妊高征发病机制的研究正逐步深入.Koni jnenberg等认为循环活化血小板(circulating activative platelet,CAP)增高是妊高征病理生理变化的一个重要方面.本文选择了血小板膜表面纤维蛋白原受体(fibrinogen r
纤维蛋白溶解(纤溶)动力学检测是利用UV2000型分光光度计联接微机,自动扫描观测并记录血液凝固及溶解的光密度动态改变过程,建立该方法的目的是为了能动态、直观、多参数观察纤维蛋白凝块溶解情况,以此了解人体纤维蛋白溶解功能.本研究对动力学检测方法及应用进行了初步探讨.
血管性血友病(von Willebrand disease,vWD)是最常见的遗传性出血性疾病之一,是由于血浆中von Willebrand 因子(vWF)质量或数量的改变所致.vWD具有高度的的异质性,因此,应使用有效的试验方法对其进行诊断和分型.目前国内检测血管性血友病的试验主要有vWF抗原水平检测(vWF:Ag)、瑞斯托霉素辅因子活性测定(vWF:Rcof)、瑞斯托霉素诱导的血小板聚集试验(
我国检验界很早就重视标准工作.从国家实行改革开放政策以来,特别是1982年成立了卫生部临床检验中心(临检中心)以后,对标准工作给予了足够的重视.如在1984年,临检中心在石家庄市召开了生化标准会议,会后以卫生部临床检验中心名义发布了血糖、总胆红素、丙氨酸氨基转移酶(ALT,赖氏法)三项推荐方法.这在当时对检测结果的统一起了积极作用.尤其是ALT,因为当时在我国流行着两种方法,即赖氏法和金氏法,二者