植酸通过线粒体途径诱导人肝癌细胞凋亡作用研究

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目的:探讨植酸(phytic acid,IP6)如何通过线粒体途径诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,为研究IP6的抗肿瘤作用提供理论依据。方法:应用Hoechst 33258荧光染色法和流式细胞仪Annexin-FITC/PI双染法观察不同浓度IP6作用HepG2细胞后的凋亡情况;流式细胞仪检测IP6作用HepG2细胞后线粒体膜电位(△Ψm)的变化;RT-PCR法检测HepG2细胞内caspase-3mRNA的表达变化;Western Blot法检测IP6作用HepG2细胞后Cyt-c的表达变化。结果:荧光显微镜下可观察到IP6作用后细胞出现明显的凋亡形态;与对照组相比,IP6可升高细胞凋亡率(F=342.15,q=2.928.53,P<0.05),且随着浓度增加,凋亡率逐渐升高(P<0.05);IP6可降低线粒体膜电位(F=14802.610,q=101.531209.237,P<0.05),且随着浓度增加,膜电位逐渐降低(P<0.05);IP6可增加Caspase-3 mRNA的表达(F=30.474,q=3.4069.103,P<0.05),且随着浓度增加,表达逐渐增加(P<0.05);IP6可上调细胞色素C(Cyt-c)的表达(F=87.194,q=5.24615.218,P<0.05),且随着浓度增加,表达逐渐上调(P<0.05)。结论:IP6可通过降低线粒体膜电位,上调细胞色素C水平,激活Caspase-3途径,促进人肝癌HepG2细胞发生凋亡。
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