【摘 要】
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受调控内分泌特异蛋白18(regulated endocrine-specific protein-18,RESP18)基因是1994年在大鼠垂体中叶内首次克隆的,RESP18分布于内质网上,它的表达受多巴胺能药物调节。尽
【机 构】
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复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室;
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受调控内分泌特异蛋白18(regulated endocrine-specific protein-18,RESP18)基因是1994年在大鼠垂体中叶内首次克隆的,RESP18分布于内质网上,它的表达受多巴胺能药物调节。尽管发现的时间较早,但目前对其功能的了解还不清楚。为了研究RESP18的生理功能,我们采用常规基因剔除的策略,分析表明该基因缺失后小鼠胚胎致死。研究中还发现RESP18及其一个新的剪接体RESP18-c(序列已登陆NCBI网站,编号:FJ621497.1)在黑质-纹状体内表达,我们推测RESP18与RESP18-c通过参与分泌途径和内质网应激(ERS)影响了中脑黑质多巴胺能神经元的突触传递与存活,从而对PD的发生与发展起一定的作用。小鼠多巴胺能细胞MN9D是体外PD研究中常用的细胞模型,MN9D细胞经6-OHDA和内质网应激诱导物衣霉素—mm处理后,内质网分子伴侣——受糖调节蛋白78(GRP78/Bip)和C/EBP家族成员-CHOP/GADD153表达均显著增高,而RESP18则呈现出不同的反应:150μM 6-OHDA处理MN9D细胞9小时,与对照组相比,检测发现RESP18在mRNA和蛋白水平上都有显著的增高,RESP18下游与细胞骨架相关的LIMK2分子的表达也明显上升;0.5μg/mLTm处理MN9D细胞8小时,整体的RESP18蛋白水平没有改变,而未修饰的RESP18蛋白下降了0.6倍。进一步,我们构建了过表达RESP18/RESP18-c和干扰RESP18/RESP18-c的质粒载体,与上海南方模式生物研究中心合作建立了RESP18条件剔除小鼠,RESP18的生物学功能及其在PD发病中的作用机制在深入研究之中。
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