分枝杆菌属(Mycobacterium)是一类细长的杆菌，因有分枝生长的趋势而得名，按照致病特点或生物学特性不同又可将其分为结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、非结核分枝杆菌(Nontuberculosis Mycobacteria)和麻风分枝杆菌(M.leprae)三类。 本文以甲醇为衍生化试剂，在浓硫酸的催化作用下，不经分离直接在分枝杆菌菌粉中把脂肪酸转化为相应的脂肪酸甲脂，并采用自制的溶胶一凝胶甲基丙烯酸丁酷书经基硅油复合涂层固相微萃取探头对其进行顶空固相微萃取，用毛细管气相色谱-质谱联用技术对萃取物进行分析，在优化得到最佳的分析条件下对方法进行了评价，并在此条件下对14种标准分枝杆菌参考菌株的细胞脂肪酸成分进行测定，通过对多次重复分析结果进行比较，找到了不同分枝杆菌脂肪酸分布的较为稳定的差异，并根据这些差异实现了不同分枝杆菌的分类。按照这种方法，根据34株从临床标本中分离出的分枝杆菌的细胞脂肪酸的测定结果，对临床分离株进行了分类鉴定，并和用传统方法进行鉴定的结果进行了比较.讨论了衍生化-固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术相结合在分枝杆菌全细胞脂肪酸的测定以及进行菌种鉴定的可能性及其应用前景。