【摘 要】
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目的：构建肝癌多表位基因和含Tat PTD的多表位基因的原核表达载体,表达纯化融合蛋白,比较其细胞免疫反应。方法：中心模板法合成多表位和Tat PTD; PCR产物分别克隆入原核表达载
【机 构】
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军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850
【出 处】
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第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会
论文部分内容阅读
目的：构建肝癌多表位基因和含Tat PTD的多表位基因的原核表达载体,表达纯化融合蛋白,比较其细胞免疫反应。方法：中心模板法合成多表位和Tat PTD; PCR产物分别克隆入原核表达载体pBVIL1,构建含Tat PTD及不含Tat PTD的肝癌多表位基因原核表达载体pBVIL1/Tat+T、pBVIL1/T;诱导表达、Ni亲和层析纯化目的蛋白;ELISA检测免疫小鼠血清的抗体效价、IFNγ-ELISPOT法免疫小鼠的细胞免疫应答。结果：正确构建复合表位基因的原核表达质粒,目的蛋白质在大肠杆菌中获到高效表达,并得到有效纯化;ELISPOT检测显示Tat+T蛋白免疫组能更有效地激发特异性T细胞免疫。结论：所构建的含Tat PTD的新型复合表位抗原能激活特异性CTL反应,为基于CTL表位的肝癌免疫治疗提供了实验依据。
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