【摘 要】
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目的：获得北葶苈子(Lepidiumapetalum)中1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-二磷酸合酶(1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphate synthase,HDS)的编码基因,进行生物
【机 构】
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河南中医学院药学院 郑州 450046
【出 处】
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2015全国中医药生物化学与分子生物学年会
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目的：获得北葶苈子(Lepidiumapetalum)中1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-二磷酸合酶(1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphate synthase,HDS)的编码基因,进行生物信息学分析,并构建该基因的原核表达载体。方法：根据北葶苈子转录组测序结果中的HDS基因序列,设计特异性引物,通过PCR扩增得到北葶苈子HDS 的cDNA序列,进行TA克隆、测序及序列分析,并构建原核表达载体。结果：得到北葶苈子HDS cDNA全长2226bp,编码741个氨基酸；序列分析表明北葶苈子HDS基因编码的氨基酸序列包含1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-二磷酸合酶结构域,氨基酸序列进化关系表明北葶苈子HDS与拟南芥(Arabidopsis thaliana)亲缘关系最近；成功构建了pET-32a-LaHDS原核表达载体。结论：首次克隆得到北葶苈子HDS基因,并构建了该基因的原核表达载体,为原核表达、纯化蛋白并研究其结构和功能奠定了基础。
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