【摘 要】
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中国特有小型猪有望为异种移植提供安全可靠的合适供体。猪内源性反转录病毒是异种移植中最受关注的病毒。然而，目前对中国特有小型猪来源的猪内源性反转录病毒的研究尚不深入。本研究中，应用PcR技术将五指山猪内源性反转录病毒前病毒全基因分为两段进行扩增，然后构建前病毒全基因克隆，运用生物信息学方法对其序列进行分析，并与Genbank中收录的其他PERV全基因序列进行比对，在此基础上还进行了进化分析，构建了基
【机 构】
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国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室，军事医学科学院野战输血研究所 北京 100850 国家生物
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中国特有小型猪有望为异种移植提供安全可靠的合适供体。猪内源性反转录病毒是异种移植中最受关注的病毒。然而，目前对中国特有小型猪来源的猪内源性反转录病毒的研究尚不深入。本研究中，应用PcR技术将五指山猪内源性反转录病毒前病毒全基因分为两段进行扩增，然后构建前病毒全基因克隆，运用生物信息学方法对其序列进行分析，并与Genbank中收录的其他PERV全基因序列进行比对，在此基础上还进行了进化分析，构建了基于Env氨基酸序列的进化树。结果表明，五指山猪来源的PERV前病毒全长为8899bp，含有完整的gag、pol、env的0RF，两端为5’LTR与3’LTR两个长末端重复序列。序列比对分析发现PERV—wzsP与其他来源的PERV毒株高度相似但仍具有一定的差异性。进化分析结果表明PERV—wzs与其他A亚型毒株属于同一分支，这与PCR分型鉴定的结果也相一致。此外，我们还发现该株PERV前病毒的5’LTR中有多个u3重复金的存在，这可能会导致PERV—wzs在宿主细胞中复制能力的增强；3’LTR中含有PERV—c亚型中的特异性序列，这将可能导致部分的PERV—c序列与PERV—A序列发生重组。然而，我们还需要进行更深入的研究来对这种推测进行验证。本研究有助于深入了解五指山猪内源性反转录病毒的分子生物学特性，并为下一步构建PERV感染性克隆奠定了良好基础。
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衣壳蛋白VP60是兔出血症病毒粒子的主要结构蛋白，是病毒免疫保护性抗原。为研发兔出血症疫苗，对兔出血症病毒主要结构蛋白VP60的编码基因的序列进行密码子优化并。利用大肠杆菌表达系统获得重组蛋白并制备了效价高且特异性好的兔源多克隆。利用家蚕杆状病毒表达系统成功表达了VP60蛋白，经检测，VP60蛋白在家蚕中含量高并可形成病毒样空衣壳粒子。动物免疫实验显示，该空衣壳疫苗可有效刺激机体产生特异性抗体，攻
目的：为了建立可特异性地检测血清中抗小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体。方法：对具有PPRV特异性的N蛋白第1V区域进行扩增，并克隆至原核表达载体pET-32a(+)载体中，用于PPRV N亚单位重组蛋白的表达。用纯化的重组蛋白作为检测抗原，建立了检测血清中存在的抗PPRV抗体的间接ELISA方法，并对间接ELISA抗原包被量、血清稀释倍数、血清孵育时间等反应条件进行了优化。结果：western bl
为了解析基因型相同但宿主来源不同的新城疫病毒的全基因组差异。本文采用RT—PcR方法分别获得4株(JS／3／09／Ch，ZJ／3／10／Ch，AH／2／10／Du，JS／9／08／Go)Class I基因3型病毒的全基因组核苷酸序列，并与GenBank中已公布的Class I基因3型病毒全基因组序列进行比对分析。本实验4株病毒的基因组长度均为1 5198bp，在基因组1607—1608位有6碱基的
结构化教学能从多方面促进学生"学会学习",从而深度学习。在教学中,教师可以联系旧知,寻求起点对比分析,加强沟通;逆向思维,探索异同;总结经验,概括拓展;综合实践,创新应用等策略引导并帮助学生构建理性的思维体系,使学生能够以结构化的眼光去看待知识的学习过程,进而能够系统化的掌握学习技巧。
自2010年冬天华南地区部分鸭场爆发了一种以产蛋严重下降为主要特征的传染病，通过PcR检测和序列测定，该病原被确定为鸭坦布苏病毒。对广东地区鸭场分离鉴定的2株病毒Fs株和JM株进行基因组序列测定和分析，结果Fs株和JM株与国内最先报道的BYD一1株的序列相似性高达99％以上，与鹅黄病毒Js804序列相似性也高达99％以上。序列分析结果显示，鸭坦布苏病毒序列保守性高，鸭坦布苏病毒可能从我国华东地区迅
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