【摘 要】
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本实验分别针对Mmc与Mo 16S rRNA基因设计2对特异性引物，应用Mmc标准株PG3与Mo标准株Y98后，提取基因组DNA，建立PCR反应体系，并分别优化反应条件与反应体系，检测所建方法的特异
【机 构】
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贵州大学动物科学学院,贵州 贵阳 550025
【出 处】
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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
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本实验分别针对Mmc与Mo 16S rRNA基因设计2对特异性引物，应用Mmc标准株PG3与Mo标准株Y98后，提取基因组DNA，建立PCR反应体系，并分别优化反应条件与反应体系，检测所建方法的特异性、敏感性及临床应用性。结果显示，以特异性引物Ps/Pa与Ms/Ma建立CCPP病原快速诊断PCR方法，最佳引物、Mg2+及dNTP浓度分别为0.8pmol/μL,1.5nmol/μL,0.2nmol/L，Ps/Pa与Ms/Mo比例为1：1，退火温度为54℃40s，可最小检出Mmc与Mo核酸量分别为0.1ng,0.01ng，敏感性良好。通过特异性与临床疑似病例检测，证明所建方法具较好特异性，可应用于临床病例诊断。
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