【摘 要】
：
本研究以中国南海东沙群岛附近海域深海沉积物为研究对象,采用玻璃珠裂解法、酶解法、化学裂解法和商品化环境基因组分离试剂盒等方法提取沉积物总DNA,用PCR-DGGE技术评价不
【机 构】
：
中山大学生命科学学院,有害生物控制与生物资源利用国家重点实验室,广州,510275
【出 处】
：
2006全国海洋生物技术与海洋药物学术会议暨全国第九届海洋药物学术研讨会
论文部分内容阅读
本研究以中国南海东沙群岛附近海域深海沉积物为研究对象,采用玻璃珠裂解法、酶解法、化学裂解法和商品化环境基因组分离试剂盒等方法提取沉积物总DNA,用PCR-DGGE技术评价不同方法对沉积物DNA多样性的影响,在此基础上改进了DNA提取方法,提取的DNA完整性更好产率更高,并表现出较好的基因组多样性.首次构建pET30表达系统的深海沉积物宏基因组文库.文库克隆平均插入片段为1.2kb,转化效率为2.3×107个/μg DNA克隆.结合SDS-PAGE分析从pET30a表达文库筛选得到假定RNase HI基因,序列比对显示,pET30-04A11结构与功能类似于RNase HI.结果证明利用强启动子构建宏基因组文库并结合SDS-PAGE电泳分析能够有效筛选出具有蛋白表达的克隆,避免了那些有表达而无活性克隆或表达有活性却不能分泌到胞外的克隆漏筛.本文还构建了以pUC19为克隆载体的深海沉积物宏基因组文库,插入片段平均大小为6.2kb,每微克DNA得到的克隆为5000～10000个.从文库中随机挑取克隆进行序列分析.克隆pUC19-14序列分析发现该序列含有一个开放阅读框架(ORF)编码的是一种跨膜蛋白,克隆pUC19-35序列分析表明该段序列是来自与莽草酸途径基因簇相关的一段序列.其中含有两个ORF编码的蛋白是假定莽草酸激酶和3-脱氢奎尼酸合成酶,这些基因在应用生物工程生产重要药理活性物质奎尼酸和莽草酸工艺中可能具有重要价值.
其他文献
目的对建立SPF级地鼠大规模生产及其质量控制体系进行初步探讨.方法引进SPF级地鼠种子在SPF生产车间进行大规模生产.结果SPF级实验动物生产设施符合国家标准,其人流、物流、
为保证屏障系统中实验大、小鼠的微生物质量合格,要采取一系列的措施加以控制.主要措施有制订各项规章制度,对工作人员进行培训和考核,系统设备的正确使用及维护,内环境的维
实验动物的遗传质量控制是实验动物标准化的一个重要方面,而遗传检测技术是保证遗传质量符合要求的手段.本文主要阐述了实验动物遗传检测技术的新进展.
商业地理主要研究商业活动的地理分布,商业活动与自然、经济、社会文化环境的关系,商业活动的空间组织或地域结构规律等商业活动的地域特点。但是,楼宇对讲商业地理并不从理
胰岛素抵抗是Ⅱ号糖尿病的重要特征,而肥胖可引起胰岛素抵抗,因而肥胖也是糖尿病的诱因之一.但是,到目前为止,肥胖和胰岛素抵抗的机理、肥胖和糖尿病之间的关系尚未解释清楚.
本文论述了近年来,随着分子生物学技术的飞速发展,使得对遗传信息DNA的直接监测成为可能,各国学者也纷纷尝试将各种新技术应用于实验动物的遗传监测,以便能更直接、准确的反
可铁宁是尼古丁的主要代谢产物之一 ,已成为评估吸烟量的特异性生物标志物。本研究旨在探讨以血中可铁宁水平和自述吸烟状况两项指标综合评估吸烟量的准确性。选取某医院支气
从27份深海沉积物中筛选到30株产淀粉酶菌,并对其中的W7菌株的产酶条件及酶学性质进行了研究.其最适生长温度为25℃,能适应较大范围的pH值和盐度.该菌株可利用多种碳源,但只
目的对恒河猴二次接种H5N1亚型流感病毒,并初步评估一次接种对二次接毒感染的影响.方法已经环甲膜穿刺注射尿囊液的6号猴和流感病毒H5N1亚型的3、4、5号恒河猴,3个月后再次同
以CO2为活化剂制备了粘胶基活性炭纤维,并研究了CO的加入对孔结构的影响.结果表明:在制备ACF的过程中加入CO,可以影响气化反应进而影响ACF的孔结构和分维,适量引入CO可以促进