连翘根醇提物体外诱导TE-13细胞凋亡机制的研究

来源 :2012年全国肿瘤分子标志学术大会与国际肿瘤转化医学论坛暨第七届中国中青年肿瘤专家论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:falconlingzi
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  目的:从基因及蛋白水平探讨连翘根醇提物(ethanol extract of Forsythia suspensa root,FSEER)诱导人食管癌TE-13细胞凋亡的作用机制.方法:采用流式细胞(Flow cytometry,FCM)检测不同浓度FSEER (0.4,0.5,0.6 mg/ml)作用于TE-13细胞24h后,线粒体膜电位的变化;采用免疫印迹技术(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白(caspase-3、caspase-8、caspase-9和胞浆Cyt-c)在FSEER诱导TE-13细胞凋亡过程中的作用;通过RT-PCR方法检测0.4,0.5,0.6 mg/ml FSEER作用于TE-13细胞24h后,细胞凋亡相关基因Bax、Bad、Noxa、Bcl-2,Bcl-x1,Mcl-1的表达变化.结果:TE-13细胞经0.4,0.5,0.6mg/ml FSEER作用24小时后,随FSEER作用浓度的增大,发生线粒体膜电位损伤的细胞数目逐渐增多,且明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);Westernblot分析结果显示,经FSEER处理后,TE-13细胞cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和胞浆Cyt-c 表达水平逐渐增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),而caspase-8表达水平没有明显变化,与对照组相比差异没有统计学意义(P>0.05);RT-PCR检测结果显示,FSEER可以上调TE-13细胞Bax,Bad,Noxa表达,下调Bcl-2, Bcl-xl,Mcl-1表达.结论:FSEER可能是通过依赖于线粒体的细胞凋亡内源途径而诱导人食管癌TE-13细胞发生凋亡.
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