抑制性消减杂交方法筛选鹅肥肝形成中差异表达基因

来源 :第十四届全国家禽科学学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:daidaide21
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实验以朗德鹅为实验素材,采用抑制性消减杂交技术对填肥鹅和未填肥鹅肝脏RNA进行正反两向消减杂交获得鹅肥肝差异表达基因文库,结合斑点印迹杂交筛选差异基因克隆并进行测序分析。斑点杂交筛选后共获得517个差异克隆,经测序分析得到116个差异表达基因。其中鹅肥肝相关上调表达基因88个,下调表达基因28个,未知基因18个,假设性基因26个。差异表达基因GO聚类分析显示这些基因主要参与细胞生化过程、信号转导、脂肪合成代谢等生物学过程。荧光实时定量PCR技术检测结果证明,代谢相关差异表达基因的表达规律与消减杂交的结果基本一致。进一步的代谢途径分析(KEGG)表明,SCD、ELOVL6、ACSL1等基因及其代谢通路在肥肝形成过程中发挥极其重要的作用。
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