ADR渗透泵肾病综合征模型研究及真武汤对其AQP2的影响

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目的:采用微渗泵技术恒释阿霉素(ADR)诱发肾病综合征模型,避免静脉注射造模的诸多缺点,类似临床病理进程,为探讨肾病综合征(NS)发病机理及药理研究提供新的造模方法;通过观察温阳利水法的经典方剂真武汤对该NS模型治疗作用,从AQP2蛋白及基因表达探讨NS的发病机制,阐明真武汤治疗NS的作用环节。方法:ADR(14.5mg/kg)按渗透泵灌注要求填充,手术植入大鼠腹腔,通过渗透压恒释ADR诱发肾病综合征模型,以真武汤干预,观察动物一般情况(精神状态、体重、体毛、饮食状况以及活动情况),通过一般指标(尿蛋白、血压、血脂(TG、TC)、血浆总蛋白及白蛋白、血肌酐、尿素氮、胱抑素C)以及免疫荧光检测肾小球基底膜IgG表达,评价ADR渗透泵肾病综合征模型以及真武汤的干预作用;RT-PCR、Westernblot检测肾病综合征模型大鼠肾脏AQP2的表达,初步探讨真武汤对肾病综合征大鼠作用的分子机制。结果:ADR渗透泵NS大鼠成活率显著提高,实验过程中无动物死亡;模型组大鼠造模1周出现典型的肾病综合征症状,与空白组比较,24h尿蛋白、血压、血脂明显升高,血清蛋白及肾功能明显降低(P<0.01);治疗4周后,与模型组比较,真武汤高低剂量组(24.0g.kg-1·d-1、12g·kg-1·d-1)能显著改善NS大鼠精神、活动、摄食量、毛色等状况,明显减轻NS大鼠24h尿蛋白,降低血压,恢复大鼠血清蛋白水平,降低大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、胱抑素C(Cys-C)水平(P<0.05或P<0.01),减少大鼠肾小球系膜区IgG的沉积;与空白组比较,模型组大鼠肾脏AQP2 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.01),与模型组比较,真武汤给药组大鼠肾脏AQP2表达量均有不同程度提高(P<0.05或P<0.01)。结论:通过渗透泵恒释ADR建立肾病综合征模型,可提高造模成功率和模型稳定性,真武汤能减少NS大鼠尿蛋白,提高血浆蛋白水平,减少高凝状况,恢复肾功能及肾小球结构,改善NS症状;真武汤能显著提高模型组大鼠肾脏AQP2 mRNA及蛋白的表达,其治疗肾病综合征的分子机制可能与其提高AQP2表达有关。
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