γ射线照射对AEC和LFB生物学行为的影响研究

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目的放射性肺损伤(RPI)是胸部肿瘤放疗、骨髓移植预处理等常见的并发症之一,也见于战时核辐射及平时核事故。肺泡上皮细胞(AEC)是RPI的主要靶细胞,肺成纤维细胞(LFB)是RPI发生发展的主要效应细胞,DNA是γ射线损伤靶分子,细胞凋亡是DNA损伤结局之一,本文旨在探讨γ射线照射对AEC和LFB的增殖活力、DNA损伤及凋亡等生物学行为的影响。材料和方法A549细胞和MRC-5细胞传代培养,60Coγ射线照射,剂量分别为5、10和20Gy,分别在照射后30min、1、3、6、12、24、48和72h,应用MTT法、γH2AX免疫荧光、AO/EB染色、实时荧光定量PCR、免疫印迹及上述结果的定量分析等方法检测细胞增殖活力、DNA损伤、细胞凋亡及凋亡诱导因子AIF的表达。结果 1.γ射线照射后A549细胞和MRC-5细胞增殖活力的变化:5、10和20Gyγ射线照射均抑制A549细胞增殖;照射后48和72h,10和20Gyγ射线抑制MRC-5细胞增殖,而5Gyγ射线照射促进其增殖。2.γ射线照射后A549细胞和MRC-5细胞的DNA损伤:三个剂量γ射线照射后A549细胞均出现DNA损伤,照射后30min、1h、3h,DNA损伤细胞不断增加,且剂量越高,DNA损伤细胞越多,照射后6h、12h阳性细胞逐渐减少;不同剂量γ射线照射后MRC-5细胞只在部分时间点出现少量γH2AX阳性细胞。3.γ射线照射后A549细胞和MRC-5的细胞凋亡:三个剂量γ射线照射后A549细胞均出现凋亡,且剂量越大凋亡细胞越多。三个剂量γ射线照射后MRC-5细胞未检测到凋亡细胞的出现及AIF的表达。结论 AEC较LFB对γ射线更敏感,受照射后易出现DNA损伤及细胞凋亡。
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