【摘 要】
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目的:建立及比较Vero细胞制备抗原检测VZV IgG全病毒和糖蛋白ELISA方法。方法:用15L瓶大规模旋转培养VZV Vero细胞适应株。收获病变细胞,经超声破碎、离心,制备了VZV全病毒ELISA抗原;经亲和层析纯化制备VZV糖蛋白ELISA抗原。检测了两种抗原的最适使用浓度、保存稳定性、方法可重复性等建立了VZV全病毒ELISA(VARELISA)和糖蛋白ELISA(gpELISA)方法。
【机 构】
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北京生物制品研究所,北京,100024 天津大学化工学院制药工程系,天津,300072
【出 处】
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第四届全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会
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目的:建立及比较Vero细胞制备抗原检测VZV IgG全病毒和糖蛋白ELISA方法。
方法:用15L瓶大规模旋转培养VZV Vero细胞适应株。收获病变细胞,经超声破碎、离心,制备了VZV全病毒ELISA抗原;经亲和层析纯化制备VZV糖蛋白ELISA抗原。检测了两种抗原的最适使用浓度、保存稳定性、方法可重复性等建立了VZV全病毒ELISA(VARELISA)和糖蛋白ELISA(gpELISA)方法。通过检测WHO VZV国际标准血清、与国外试剂盒比较、检测健康献血员血清和阳性血清的筛选比较了方法的特异性和敏感性,
结论:用vero细胞培养VZV成功大量制备了全病毒和糖蛋白抗原,用以建立的人血清抗VZV IgG的VARELISA和gpELISA方法特异性好、灵敏度高、可重复性强,对WHO抗VZV国际标准参考血清血清的最低检出量分别为781和195mIU/ml,其中gpELISA的特异性、灵敏度优于传统的VAR ELISA。
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