【摘 要】
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目的：CD4+辅助性T细胞亚群Th1/Th2失衡是被公认的哮喘免疫学发病机制,因此着力纠正哮喘患者Th1/Th2平衡失调是哮喘治疗的关键.观察STAT4、STAT6及CBP基因沉默引起的效应变化,以期从基因沉默方向验证STAT4和STAT6是否具有竞争CBP位点的关系.方法：使用阳离子脂质体Lipofectamine(R)LTX,将带有针对基因STAT4、STAT6和CBP的干扰质粒转染入Jurk
【机 构】
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儿童发育疾病研究教育部重点实验室;重庆医科大学儿研所呼吸病学研究室,重庆市重点实验室 重庆医科大学
【出 处】
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中华医学会第十八次全国儿科学术会议
论文部分内容阅读
目的：CD4+辅助性T细胞亚群Th1/Th2失衡是被公认的哮喘免疫学发病机制,因此着力纠正哮喘患者Th1/Th2平衡失调是哮喘治疗的关键.观察STAT4、STAT6及CBP基因沉默引起的效应变化,以期从基因沉默方向验证STAT4和STAT6是否具有竞争CBP位点的关系.方法：使用阳离子脂质体Lipofectamine(R)LTX,将带有针对基因STAT4、STAT6和CBP的干扰质粒转染入Jurkat细胞,使用氯霉素乙酰转移酶ELISA和荧光素酶报告基因试剂盒分别检测基因IFNG和IL4R启动子的活性,以确定转录分子STAT4和STAT6的活性程度.结果：①基因CBP沉默后检测IL4R启动子的活性,经统计学分析有统计学意义(P＜0.0001);②基因CBP沉默后检测IFNG启动子的活性,经统计学分析有统计学意义(P＜0.05);③基因STAT4和STAT6沉默后检测IL4R启动子的活性,经统计学分析发现沉默STAT4组和沉默STAT6组之间没有统计学意义(P＞0.05);④基因STAT4和STAT6沉默后检测IFNG启动子的活性,经统计学分析发现两组差别没有统计学意义(P＞0.05).结论：CBP是转录因子STAT4和STAT6发挥活性的重要辅助分子;CBP在Jurkat细胞中的表达是有限的;在入和小鼠细胞中的CBP结构高度保守;本实验中,转录因子STAT4和STAT6在结合CBP位点方面并没有体现出明确的相互竞争关系,两者的具体关系还需要进一步研究.
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