【摘 要】
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食源性细菌是导致食品中毒的主要因素。快速、高效、准确地鉴定食源性细菌是目前急需解决的问题。本研究开发了一种集成了封闭式的样品准备与重组酶聚合酶扩增(RPA)的多重检测微流控芯片,可在45 min 内实现3 种病原菌的快速检测。芯片采用多层软光刻技术以聚二甲基硅氧烷作为芯片材料,玻片作为基底,是一款具有4 层结构以及螺丝微阀控制功能的微流控芯片。芯片的样品前处理部分基于磁珠法核酸提取,可在15 mi
【机 构】
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浙江大学工业控制技术国家重点实验室,智能系统与控制研究所,分析仪器研究中心 浙江大学生命科学学院
【出 处】
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中国化学会第十二届全国微全分析系统学术会议、第七届全国微纳尺度生物分离分析学术会议、第七届国际微流控学学术论坛
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食源性细菌是导致食品中毒的主要因素。快速、高效、准确地鉴定食源性细菌是目前急需解决的问题。本研究开发了一种集成了封闭式的样品准备与重组酶聚合酶扩增(RPA)的多重检测微流控芯片,可在45 min 内实现3 种病原菌的快速检测。芯片采用多层软光刻技术以聚二甲基硅氧烷作为芯片材料,玻片作为基底,是一款具有4 层结构以及螺丝微阀控制功能的微流控芯片。芯片的样品前处理部分基于磁珠法核酸提取,可在15 min 内完成核酸提取。数字核酸扩增分为4 个区域共12800个小室,每个小室的体积为2 nL,反应组分预包埋到不同区域小室中,采用时间极短的RPA 进行快速检测,芯片可同时检测3 种病原菌。核酸提取区与检测区通过重力与负压实现了样品进样,不需要外接的泵。同时,全封闭式的样品前处理功能避免了样品与环境的交叉污染。实验结果表明,该集成式多重数字RPA 微流控芯片可实现牛奶中食源性细菌(大肠埃希菌,沙门氏菌,单增李斯特菌)的快速检测,具有操作简单,快速高效,结果精准的优点,为食源性细菌的快速检测提供了一种有效工具。
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